Caracterizacao funcional das isoformas de splicing do gene adam23.

Resumo

As ADAMs são proteínas de superfície celular capazes de exercer atividade proteolítica e de adesão celular. Nosso grupo tem estudado o papel do gene ADAM23 na tumorigênese de mama. Demonstramos que o gene ADAM23 está silenciado em tumores de mama de estádio mais avançado e que seu silenciamento está associado à pior prognóstico. ADAM23 é capaz de interagir com a integrina aVb3, que na sua forma ativa promove a formação de metástases. Recentemente, foram descritas duas isoformas de splicing do gene ADAM23, denominadas ADAM23beta e ADAM23gama, muito semelhantes à forma previamente descrita, ADAM23alfa, exceto pela ausência do domínio transmembrana na isoforma gama, que provavelmente consiste em uma proteína secretada, e pela existência de um domínio transmembrana em ADAM23beta distinto do que ocorre na isoforma alfa. Este projeto tem como objetivo inicial verificar se existe expressão diferencial das isoformas de splicing do gene ADAM23 em tecido mamário, analisando separadamente células epiteliais e estromais. Em um segundo momento, pretendemos gerar linhagens celulares de mama super-expressando cada uma das variantes do gene ADAM23 a fim de caracterizar a localização das isoformas ADAM23 alfa e beta na membrana celular, de confirmar que ADAM23 gama realmente é uma proteína secretada e de elucidar o papel funcional de cada uma das isoformas na regulação da ativação da integrina aVb3 e nos processos de adesão e migração celular. (AU)