Caracterizacao das alteracoes moleculares geradas pela mutacao associada com a letalidade da linhagem kg00562 de drosophila melanogaster.

Resumo

A linhagem KG00562 é uma entre milhares de linhagens de D.melanogaster utilizadas no contexto do genoma funcional. A inserção do elemento transponível P nesta linhagem foi associada com o lócus CG8709 que codifica lipina, proteína que pertence a uma nova família de fosfatases de ácido fosfatídico dependente de Mg+. Dados de nosso laboratório mostram que esse locus codifica isoformas protéicas distintas expressas em tecidos específicos. Por exemplo, DmLpin A e DmLpin C são expressas no intestino e túbulos de Malpighi e a isoforma B, no cérebro larval. A isoforma neural compartilha seu primeiro exon com o locus vizinho que codifica Kermit, caracterizado em Xenopus como participante da via de sinalização de Wnt. Na linhagem KG00562 o transcrito da isoforma neural de lipina não é detectado, sendo contudo observada a presença de um RNA adicional de aproximadamente 2,5 kb, detectado com sonda derivada do primeiro exon de DmLpin B, que é compartilhado com Kermit. Este RNA adicional está provavelmente associado com o ganho de função observado na linhagem KG00562, caracterizado por um alto índice de letalidade. Mesmo em background selvagem, cerca de 73% dos animais que carregam a inserção KG00562 não completam o desenvolvimento. Com vistas a contribuir para caracterizar as bases moleculares associadas com a letalidade da linhagem KG00562, neste projeto propomos clonar e caracterizar a estrutura primária e o padrão tecidual de expressão do RNA adicional de 2,5 kb expresso nesta linhagem mutante. (AU)