Efeitos da Administração de Células Tronco com e sem Expressão do Gene Pkd1 sobre a Lesão Induzida por Isquemia/Reperfusão e o Potencial Cistogênico Renal

Resumo

A doença renal policística autossômica dominante (DRPAD) é a doença humana monogênica potencialmente letal mais prevalente, constituindo-se numa das principais causas de doença renal crônica terminal (DRCT). Esta enfermidade é causada por mutações em um de dois genes, PKD1 (Polycystic Kidney Disease 1) ou PKD2, sendo que ~85% dos casos devem-se a mutações em PKD1. Várias evidências apóiam um modelo de dois eventos para a formação focal de cistos na DRPAD, incluindo a mutação germinativa como o primeiro golpe e uma mutação somática no alelo previamente normal como o segundo evento. Estudos recentes, por sua vez, sugerem a necessidade de um terceiro golpe para a formação rápida de cistos no rim maduro. A lesão induzida por isquemia/reperfusão (IR) é uma causa freqüente de lesão renal aguda, decorrendo de anormalidades hemodinâmicas, celulares e moleculares. Recentemente demonstramos que camundongos haploinsuficientes para Pkd1, o gene ortólogo a PKD1 neste animal, apresentam lesão renal mais severa que animais selvagens e formação de microcistos quando submetidos a insulto por IR. É provável, portanto, que a capacidade de regeneração renal pós-isquemia esteja prejudicada em camundongos Pkd1+/- e em pacientes com DRPAD e que este tipo de insulto possa contribuir para a aceleração da doença renal. Além disso, é fundamental entender o papel da isquemia como um terceiro golpe potencial, possivelmente envolvido na cistogênese tardia de animais deficientes em policistina-1 e em pacientes com DRPAD. Neste projeto, pretendemos analisar essas questões por meio de uma abordagem baseada em administração de células tronco hematopoiéticas (CTHs) com e sem expressão de Pkd1, em camundongos submetidos a insulto por IR. Para tanto, utilizaremos dois modelos animais geneticamente modificados: um modelo não cístico de haploinsuficiência (Pkd1+/-), e camundongos com alelos nulos condicionais de Pkd1, um modelo que reproduz fenotipicamente a doença humana (Pkd1cond/cond:Balcre). Nesse contexto, os objetivos específicos do projeto compreenderão: 1) Analisar e comparar as lesões por IR em camundongos Pkd1+/+ submetidos à administração de CTHs Pkd1+/+ ou Pkd1-/-; 2) Caracterizar e comparar as lesões por IR em camundongos Pkd1+/- e Pkd1+/+ submetidos à administração de CTHs Pkd1+/+; 3) Analisar e comparar as lesões renais tardias determinadas por indução de IR em camundongos Pkd1+/- submetidos ou não à administração de CTHs Pkd1+/+; 4) Avaliar e quantificar o potencial cistogênico e fibrogênico de CTHs Pkd1-/- administradas a animais Pkd1+/+ pós-indução de IR; e 5) Analisar e comparar as lesões por IR em camundongos Pkd1cond/cond:Balcre submetidos à administração de CTHs Pkd1cond/cond, animais Pkd1cond/cond:Balcre não tratados com CTHs e camundongos Pkd1cond/cond submetidos à administração de CTHs Pkd1cond/cond. (AU)