Novos adjuvantes vacinais derivados da toxina termo-labil (lt) de escherichia coli enterotoxigenica (etec)

Resumo

As toxinas termo-lábeis produzidas por linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) e Vibrio cholerae são os adjuvantes de mucosa mais bem estudados e representam um importante tema de pesquisas acadêmicas e aplicadas. O trabalho prévio desenvolvido pelo nosso grupo de pesquisa permitiu a identificação de novos variantes de LT a partir do estudo da biodiversidade natural de amostras de ETEC isoladas de crianças brasileiras. Uma variante de LT, a LT4, identificada revelou propriedades adjuvantes preservadas, aliado a uma baixa toxicidade tanto em condições in vitro como in vivo (Lasaro et al. J. Bacteriol., 190:2400-10, 2008). O presente projeto tem como objetivo explorar as propriedades imunomoduladoras da LT4, assim como outros variantes de LT, encontrados na microbiota brasileira ou gerados em laboratório, e determinar suas propriedades adjuvantes frente a diferentes antígenos administrados por via de mucosa e parenteral. Especificamente o projeto focará quatro etapas experimentais principais: (i) identificação de(s) mutação(ões) atenuadora(s) que confirem propriedades imunomoduladoras aos variantes de LT obtidos; (ii) construção, por técnicas de engenharia genética, e purificação de variantes de LT com propriedades adjuvantes desprovidas de efeito tóxico; (iii) caracterização dos efeitos adjuvantes dos novos variantes de LT, com ênfase em respostas imunológicas humorais e celulares, induzidas em camundongos após imunização por diferentes vias de administração com diferentes antígenos alvo co-administrados, em particular, ovalbumina (OVA), proteína p24 do vírus da imunodeficiência humana (HIV) e proteína gD do vírus herpes humano (HSV); (iv) determinação de ocorrência de efeitos adversos eventuais e processos inflamatórios nos animais imunizados com os derivados de LT. A pesquisa tem características inéditas no país e no mundo e contribuirá para o conhecimento acadêmico das propriedades adjuvantes de LT e deve contribuir para a descoberta de compostos biotecnológicos com aplicação vacinai. (AU)