Avaliação da resposta imunológica de camundongos à glicoproteína do vírus rábico (RVGP) sintetizada in vivo pela imunização com Semliki Forest Vírus (SFV) recombinante

Resumo

O sistema de expressão Semliki Forest Virus (SFV) tem sido utilizado para a expressão de moléculas de interesse bitecnológico in vitro, e moléculas de interesse médico in vivo. Caracterizado por infectar uma ampla diversidade de células, notadamente as células de mamíferos, o SFV tem sido proposto como sendo um promissor vetor vacinal. No entanto, pouco ainda está descrito sobre suas propriedades imunológicas e adjuvantes. Seu uso ainda é limitado por algumas dificuldades tecnológicas, tais como a utilização de metodologia imprecisa de titulação viral. Neste projeto, partículas de SFV recombinantes infecciosas, mas não replicativas, serão obtidas por técnicas de biologia molecular, a partir de plasmídeos já construídos e testados. Essas partículas carregarão a informação genética da glicoproteína do vírus da raiva -RVGP- (SFV-RVGP) e serão capazes de estimular a formação de anticorpos neutralizantes em animais imunizados, conforme foi avaliado em ensaios preliminares. Para superar a dificuldade de titulação dessa partícula viral recombinante, será estabelecido um método inovador de qRT-PCR dirigido à quantificação do RNA viral presente nos lotes virais preparados. As partículas então serão utilizadas para a imunização de animais de laboratório, para a verificação do padrão de resposta imune gerado, se predominantemente humoral ou celular e quais as características principais da resposta imune desencadeada. Os animais imunizados serão eventualmente submetidos ao teste de desafio contra a infecção experimental pelo vírus rábico, de maneira a determinar a potência da vacinação com SFV-RVGP. (AU)