Estudo dos efeitos de compostos de telúrio e tiosemicarbazonas sobre grupos tiólicos de proteínas

Resumo

Tiosemicarbazonas e compostos de telúrio possuem conhecida capacidade de oxidar grupos tiólicos proteícos. Modificações nestes grupos interferem em vários processos mitocondriais e celulares. Mitocôndrias isoladas e cultivos celulares são modelos biológicos ideais para estes estudos. Na presente tese avaliamos a ação de tiosemicarbazonas e de compostos de telúrio na bioenergética de mitocôndrias isoladas, em células em cultura e no proteoma mitocondrial. As tiosemicarbazonas TSC-H, TSC-Me, TSC-F, TSC-Cl e TSC-NO2 induziram apoptose em células K562, e a TSC-NO2 em especifico parece ser capaz de quelar ferro e induzir a morte celular através de um mecanismo diferente das demais tiosemicarbazonas, além disso possui baixa toxicidade para células PBMN. O composto de telúrio RVF19 mostrou-se capaz de oxidar grupos tiólicos, depletar GSH, diminuir a RCR mitocondrial e causar a abertura do poro de transição de permeabilidade (PTP) mitocondrial regulado por CsA. Os compostos de telúrio RT-03 e RT-07B causaram a perda do potencial de membrana mitocondrial em células MLAC.Os compostos organotelúricos RT-03, RT-04, RT-07B e RVF19 são capazes de induzir a abertura do PTP mitocondrial que é resultante da aglomeração proteíca causada pelo ataque oxidativo desses compostos. A análise desse aglomerado proteíco revelou a presença das subunidades da a e b da ATP sintase, mostrando que o PTP provavelmente é formado pela dimerização da F0F1 ATP sintase. Por fim, o protocolo de eletroforese bidimensional (2D-DIGE) foi estabelecido, bem como a técnica de REDOX-DIGE para amostras marcadas pelas sondas fluorescentes Cy3 e Cy5 nos grupos tiólicos.