Participação do stress de retículo no processo de morte celular em neutrófilos de ratos diabéticos

Resumo

Recentemente, verificou-se que a participação do retículo endoplasmático no processo de morte celular. Essa organela pode apresentar-se sob condição de estresse devido a alterações na formação de proteínas, além de ser outro possível sítio de produção de EROs, além da NADPH oxidase e da própria mitocôndria, e exacerbar a cascata de reações decorrentes do estresse de retículo. Dessa forma, o presente projeto visa investigar a possível participação do estresse de retículo no processo de morte celular em neutrófilos de animais diabéticos através da avaliação dos retículos endoplasmáticos em neutrófilos através de microscopia de fluorescência; avaliação dos possíveis sítios de produção de espécies reativas de oxigênio pelos neutrófilos através da sonda amplex red na presença de inibidores da NADPH oxidase ou PKC; ou inibidores dos complexos I, III, IV ou V da cadeia respiratória mitocondrial; ou inibidor de participação do estresse de RE ou indutores de estresse de RE; verificação da atividade das caspases 3, 4, 7 e 12 em neutrófilos através de espectrofluorimetria; avaliação do conteúdo e possíveis ativações ou clivagens da chaperona Bip (GRP78), IRE1, PERK, ATF-6, ATF-4, eIF2-± e ERO1 envolvidos no estresse de retículo através da técnica de Western Blotting e verificação da expressão gênica de Bip, IRE-1, PERK, ATF-6, XBP-1 e CHOP através de PCR tempo real. Esse estudo visa compreender melhor a participação do RE no complexo processo de morte celular em neutrófilos de animais diabéticos e a possível interação com outros sítios intracelulares importantes no processo para esses fagócitos, como mitocôndrias e NADPH oxidase. (AU)