Participação das NETs (neutrophil extracellular traps) na atividade fungicida de neutrófilos humanos contra o Paracoccidioides brasiliensis

Resumo

Na paracoccidioidomicose são poucos os trabalhos que tiveram o objetivo de avaliar os mecanismos envolvidos na interação do Paracoccidioides brasiliensis com células fagocitárias humanas, que culminam com o desenvolvimento de mecanismos efetores e moduladores da resposta contra este fungo. Neste contexto, nos últimos anos, os trabalhos em paracoccidioidomicose têm focado o papel dos neutrófilos (PMNs), uma vez que a literatura tem demonstrado o envolvimento dinâmico dessas células na defesa do hospedeiro contra os diversos microrganismos. Estudos recentes têm mostrado que os neutrófilos podem lançar mão de uma terceira estratégia para destruir microrganismos, além da formação dos produtos do "burst oxidativo" e da descarga do seu conteúdo granular. Este novo mecanismo envolve a liberação de redes extracelulares por neutrófilos ativados, conhecidas como neutrophil extracellular traps (NETs). As NETs são compostas por fibras que contém cromatina, histonas e várias outras proteínas granulares como a "permeability increasing protein" (BPI), a elastase e mieloperoxidase. Os mecanismos que precedem a formação das NETs são desconhecidos. No entanto, existem claras evidências que neutrófilos ativados pelos diferentes patógenos ou por outros estímulos como IL-8, LPS, PMA, IFN-gama mais C5a ou GM-CSF mais C5a, resultam na ativação da NADP oxidase e na formação de espécies reativas do oxigênio como o ânion superóxido ou H2O2, que são requeridos para sinalizar a indução de um programa de morte celular diferente da apoptose ou necrose, que envolve a elaboração das NETs, que além de envolver e/ou matar microrganismos, aumentam a resposta inflamatória. Propõe-se que as NETs destruam microrganismos não fagocitados pelos neutrófilos. Este mecanismo poderia ser proposto para o P.brasiliensis, uma vez que as leveduras desse fungo podem apresentar-se de diversos tamanhos e morfologias de acordo com o tipo de brotamento que sofrem. Neste contexto, os objetivos deste projeto serão: a) Avaliar a participação das NETs na atividade fungicida de neutrófilos humanos ativados contra o P. brasiliensis. b) Avaliar a participação de receptores de reconhecimento de estruturas padrão como TLR2 e TLR4 e dectina-1 na formação das NETs.