Organização e ultra-estrutura das células imunorreativas a 5-bromo-2'-deoxiuridina (BrdU) do nicho neurogênico do ventrículo lateral, em ratos (Rattus norvegicus) Long-Evans

Resumo

Células neurais mantêm seu processo de divisão durante a fase adulta do desenvolvimento. Tal atividade é restrita a dois nichos proliferativos do encéfalo, dos quais se destaca a zona ventricular. Trata-se da região que envolve o epêndima e a zona subependimária (ZSE) do ventrículo lateral e que, mesmo adjacentes, possuem células que diferem em termos ultra-estruturais e neuroquímicos. Estudos iniciais observaram a ocorrência de proliferação exclusivamente em células da ZSE, mas são crescentes os estudos que sugerem as células ependimárias como deflagradoras da proliferação celular no encéfalo. Os argumentos atuais se fundamentam principalmente na identificação de co-localização de marcadores de ciclo de divisão celular com neuroquímica característica de células ependimárias, observadas sob microscopia de laser confocal. Para explorar adequadamente e contribuir na fundamentação do novo papel das células ependimárias, torna-se necessária a caracterização em nível ultra-estrutural dos elementos neurais em divisão no epêndima, o que constitui o objetivo desse projeto. Nesse sentido, propomos estudar a citoarquitetura em nível ultra-estrutural das células imunorreativas à 5-bromo-2´-deoxiuridina (BrdU) localizadas no epêndima, assim como de suas prováveis derivações, e colaborar para a compreensão da organização tridimensional in situ das células do epêndima e da ZSE. Utilizaremos ratos adultos da linhagem Long-Evans. A partir da indução química da proliferação celular (administração i.c.v. de 1 ¼L de Ara-C, a 2% diluído em salina estéril), os animais receberão o marcador de ciclo mitótico BrdU (administração i.p. de 200 mg/kg), em dose única. Subgrupos de animais serão analisados 24 h, 72 h ou 7 dias após a administração de BrdU. Os procedimentos de investigação imuno-histoquímica anti-BrdU serão analisados em microscopia eletrônica de transmissão. Pela microscopia eletrônica de varredura de alta resolução, planejamos demonstrar os aspectos tridimensionais, in situ, das células em questão. Evidenciamos pelos resultados preliminares os aspectos citoarquitetônicos condizentes com a camada ependimária e ZSE. Além disso, o método da microscopia eletrônica de varredura de alta resolução permitiu-nos visualizar a organização da superfície ependimária e seus constituintes, cabendo estudos para estabelecer um tratamento adequado para as amostras a fim de demonstrar a organização da ZSE, seguindo rigorosamente a metodologia implementada por nosso grupo de pesquisa. (AU)