ASPECTOS DA FISIOPATOLOGIA DA SEPSE EM Piaractus mesopotamicus INDUZIDA POR Aeromonas hydrophila

Resumo

A sepse é definida como síndrome da resposta inflamatória sistêmica que ocorre durante a infecção. Embora seja uma das principais causas de mortalidade em peixes, há escassez de literatura sobre a fisiopatologia da sepse em teleósteos. Assim, este estudo pretende avaliar e caracterizar as alterações fisiopatológicas e histológicas da sepse, identificando e quantificando a expressão gênica do fator de necrose tumoral ± e da interleucina 1 na sepse induzida pela Aeromonas hydrophila em pacus, e a inflamação aguda na bexiga natatória sob a influência do quadro séptico. Para tanto, serão utilizados 260 pacus, Piaractus mesopotamicus, com peso médio de 150,71±26,73g e comprimento total médio de 15,27 ±1,60 cm. Inicialmente será feito a padronização do inóculo, pela determinação da concentração bacteriana letal para 50,0% dos peixes (CL50). A sepse será induzida pela administração intracelomática do inóculo correspondente a CL50 de A. hydrophila. Os animais serão divididos em dois grupos, um receberá 0,5 ml de solução NaCl (grupo controle) e outro grupo receberá o mesmo volume contendo o inóculo (grupo desafio) em delineamento inteiramente casualizado. Antes, meia, uma e duas horas após a inoculação serão caracterizados o perfil hematológico, bioquímico e o coagulograma do hospedeiro. Para a caracterização das alterações histopatológicas, fragmentos de fígado, baço, rim, coração e brânquias serão coletados ao término dos tempos seis, 12, 24 e 48 horas após a indução da sepse. A determinação da expressão gênica do fator de necrose tumoral (TNF-±) e interleucina 1 (IL-1), ocorrerá após 24 horas da indução da sepse, pelo método transcrição reversa-reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Imediatamente após a indução da sepse será injetado na bexiga natatória o estímulo inflamatório com tioglicolato a 6 % em solução salina 0,65 % e depois de seis, 12, 24 e 48 horas após estimulo, será coletado o exsudato para a contagem total e diferencial das células acumuladas na bexiga natatória. As bactérias serão quantificadas no sangue no exsudato. Durante todo o experimento os animais serão avaliados quanto às alterações clínicas e a taxa de mortalidade será avaliada durante o período de infecção pelo prazo máximo de observação de 10 dias. Os resultados serão comparados através de análise de variância (ANOVA) ao nível de 5% de probabilidade e a diferença entre as médias será comparada pelo teste de Tuckey.