Efeitos bioquímicos e estrogênicos do Diuron e seus metabólitos, isoladamente ou em combinação com alquilfenois em Tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus)

Resumo

O presente projeto visa elucidar mecanismos de toxicidade do diuron e de três de seus principais metabólitos (diclorofenilmetiluréia, DCPU, diclorofenilmetiluréia, DCPMU, e dicloroanilina, DCA), isolados ou em misturas do diuron com seus metabólitos, e do diuron e seus metabólitos com dois alquilfenóis ambientalmente relevantes, o nonilfenol (NP) e o octilfenol (OP). Serão realizados experimentos de exposição de tilápias por 2 e 7 dias aos compostos isolados e em combinação, e posteriormente uma série de biomarcadores bioquímicos serão avaliados: enzimas de biotransformação (isoforma 1A do citocromo P450, glutationa S-transferase), enzimas antioxidantes (superóxido dismutase, catalase, glutationa peroxidase, glicose 6-fosfato desidrogenase, glutationa redutase), níveis de peroxidação lipídica, níveis de glutationa reduzida, quantificação de micronúcleos, teste do cometa. Para avaliação do efeito estrogênico do diuron e seus metabólitos em conjunto com alquilfenóis, serão avaliados níveis de testosterona, 11-cetotestosterona, 17b-estradiol e vitelogenina no plasma dos peixes, e atividade da 17b-hidróxi-esteróide desidrogenase e aromatase no fígado, em colaboração com o Prof. Dr. Daniel Schlenk, da Universidade da Califórnia (USA). Ainda, estudos da metabolização in vitro e in vivo dos compostos pelos peixes será realizado, pela medida da presença dos compostos e seus metabólitos no plasma e na bile dos peixes por U/HPLC acoplado a espectrômetro de massas, e por experimentos de incubação dos compostos com extratos protéicos citosólicos e microsomais e quantificação da formação de produtos por U/HPLC acoplado a espectrometria de massas. Da mesma forma, a concentração dos compostos aplicados nos aquários deverá ser monitorada. Estudos do potencial inibitório dos compostos nas enzimas propostas serão também realizados in vitro, incubando-se extratos protéicos dos peixes com concentrações crescentes dos compostos e posterior medida da atividade enzimática. Acreditamos que este projeto trará uma série de novas informações a respeito dos mecanismos de ação dos contaminantes propostos em peixes, além do projeto ser importante no estabelecimento e consolidação de uma colaboração internacional. (AU)