Estudo do comportamento intracelular de M. abscessus subsp. bolettii CRM0019

Resumo

O atual projeto propõe uma continuação do trabalho realizado no projeto de iniciação científica "Caracterização in vitro do desenvolvimento intracelular de Mycobacterium abscessus subsp bolletii CRM0019", (FAPESP, processo 2011/02268-5).Mycobacterium abscessus é uma micobactéria de crescimento rápido (MCR), responsável por infecções da pele e tecidos moles e doença pulmonar, especialmente em pacientes com fibrose cística. Desde 2004, vários surtos de infecção localizada causados por membros do grupo M. abscessus foram reconhecidos em pacientes submetidos a procedimentos invasivos no Brasil. O estudo do comportamento intracelular de M. abscessus em células hospedeiras diversas, quanto a espécie e tipo celular, podem fornecer uma visão mais detalhada sobre o estado fisiológico, composicional, fusional e funcional, de fagossomos contendo micobactérias, ajudando a entender o comportamento biológico durante a infecção bacteriana. Nesse sentido, nesse trabalho propomos caracterizar a infecção intracelular de Mycobacterium abscessus subsp bolletii CRM0019, cepa de micobactéria de crescimento rápido associada a um surto de infecções que acometeu pacientes em diferentes Estados do Brasil entre 2004 e 2008, em comparação com a cepa de referência ATCC 19977 (M. abscessus subsp. abscessus). Em experimentos anteriores observamos que, embora sejam filogeneticamente próximas, a taxa de internalização da cepa ATCC19977 em células A549 foi maior em relação do que a doo isolado CRM0019. Além disso, ao longo da infecção, as bactérias de ambas as cepas permaneceram viáveis e se multiplicaram.O objetivo do presente trabalho é dar continuidade à caracterização do comportamento intracelular da cepa CRM0019, utilizando como ferramentas a imunofluorescência, citometria de fluxo e contagem de unidades formadoras de colônias, permitindo, ao final, o estabelecimento de novos parâmetros de estudo de biologia celular de MCRs.