Efeito do tratamento farmacológico com o peptídeo mimético da proteína anexina a1 em modelo de alergia ocular

Resumo

A anexina A1 (ANXA1) é uma proteína de 37 kDa envolvida na inibição das sínteses de eicosanóides e fosfolipase A2, induzidas por glicocorticóides, o que lhe confere propriedades anti-inflamatórias. Contudo, a expressão da ANXA1 em tecidos oculares normais e inflamados tem sido pouco estudada. A conjuntivite alérgica (CA) representa uma doença complexa do sistema imune envolvendo a desgranulação dos mastócitos na conjuntiva e a liberação de mediadores inflamatórios e citocinas que provocam a infiltração de células inflamatórias nesse tecido. Essa inflamação é o principal fator contribuinte para inúmeras desordens oculares, podendo levar à diminuição da acuidade visual, e até mesmo à cegueira. Nos tratamentos das inflamações intra-oculares, em geral, são os glicocorticóides os medicamentos frequentemente administrados cujos efeitos colaterais estimulam buscas por novas estratégias terapêuticas. Desse modo, analisaremos em um modelo experimental de CA, a expressão e o mecanismo de ação da proteína endógena ANXA1 nos tecidos oculares de camundongos. Os animais serão imunizados nos dias 0 e 7, por via subcutânea, com ovalbumina (OVA; 5 µg) e nos dias 14, 15 e 16, receberão instilação direta no saco conjuntival de 250 µg de OVA em 10 µl de PBS. Outro grupo de animais sensibilizados serão pré-tratados i.p. nos dias 14 a 16 com o peptídeo Ac2-26 (ANXA12-26, região N-terminal da ANXA1; 100 µg por animal) ou dexametasona (0,5 mg/kg), diluídos em 0,1 mL de PBS. Os animais controles receberão apenas PBS. Após 24 horas do último desafio com OVA, os animais serão anestesiados, submetidos à punção cardíaca para obtenção de sangue e, posteriormente, sacrificados por deslocamento cervical para enucleação dos olhos e coleta de baço e linfonodos. Os estudos serão realizados por meio de: análises histopatológicas e quantitativas de células inflamatórias nos tecidos oculares e sangue; imuno-histoquímica e Western blotting para detectar a expressão endógena da ANXA1 nos tecidos oculares, baço e linfonodos e; dosagem de IgE no sangue. Os resultados poderão indicar o mecanismo de ação da ANXA1 nos processos inflamatórios oculares alérgicos e proporcionar novas alternativas terapêuticas.