Estudo funcional de microRNAs associados ao processo de metástase em linhagens celulares de carcinoma mamário humano

Resumo

Os estudos funcionais in vitro são fundamentais para a compreensão do papel dos microRNAs (miRNAs), pequenos RNAs (14 a 20nt) não codificadores de proteínas que desempenham papel importante na regulação da expressão gênica. Metástase é o processo que mais frequentemente afeta o gerenciamento clínico de pacientes com câncer e ocorre em múltiplos passos sequenciais. No entanto, as bases moleculares das vias que regem estes passos ainda permanecem obscuras. Estudos recentes têm sugerido que determinados microRNAs (miRNAs) tem um importante papel no desenvolvimento e progressão do câncer de mama. Este projeto está dentro da linha de genômica funcional do câncer e refere-se ao estudo do papel de miRNAs na regulação da expressão de genes chaves para o processo de metástase no câncer de mama. No presente estudo pretendemos analisar a viabilidade de linhagens celulares imortalizadas de carcinoma mamário, como modelos para estudos funcionais com os miRNAs miR-183 e miR-494, previamente identificados como desregulados neste tipo de carcinoma. Nossa hipótese é que estes miRNAs, previamente apontados como desregulados em tumores de pacientes com câncer de mama, exercem importante papel na regulação da expressão de genes chaves associados ao fenótipo metastático. Utilizaremos a tecnologia de PCR em Tempo Real a fim de avaliarmos a expressão dos miRNAs mir-183 e miR-494 assim como de seus respectivos alvos em um painel de linhagens celulares de carcinoma mamário. Por meio de ensaios funcionais in vitro (superexpressão) pretendemos avaliar o papel destes miRNAs na modulação da expressão de genes chaves para o processo de metástase e o impacto dessa modulação no comportamento de células neoplásicas.