Caracterização de mecanismos de resistência a estrobilurinas no fungo Moniliophthora perniciosa, agente causador da vassoura de bruxa do cacaueiro

Resumo

A necessidade de estratégias que impeçam o desenvolvimento e alastramento da doença vassoura de bruxa do cacaueiro torna-se evidente perante a atual situação da produção de cacau nas Américas. Dentre as estratégias de controle já testadas em campo está a aplicação de fungicidas da classe das estrobilurinas, uma das drogas mais utilizadas na agricultura para controle de fitopatógenos. No entanto, este fungicida não se mostrou efetivo no controle da vassoura de bruxa. O Projeto Genoma Vassoura de bruxa serviu como base para a compreensão de possíveis mecanismos de resistência apresentados pelo fungo Moniliophthora perniciosa, agente causador da doença. Inicialmente, foi identificado um gene codificador da oxidase alternativa (Mp-aox) que se mostrou um mecanismo importante na conferência de resistência a estrobilurinas. Mais recentemente, análises do transcriptoma do fungo crescido na presença desta droga revelaram que um gene codificante de uma bomba de efluxo, Mpflr1, apresentou-se altamente expresso, fornecendo a primeira linha de evidência do envolvimento desse transportador na resistência a estrobilurinas. Com base nesses achados, o presente projeto visa à realização de testes funcionais com ambas as proteínas (MpAOX e Mpflr1), utilizando Saccharomyces cerevisiae como sistema de expressão, para a consolidação destes importantes alvos de combate à doença. No caso específico da MpAOX, um alvo já comprovado, a expressão em levedura permitirá a realização de high throughput screenings com intuito de identificar novas moléculas inibidoras da enzima que sejam estáveis e possam ser utilizadas em campo para controle da doença. Adicionalmente, identificou-se recentemente em nosso laboratório um mutante natural de M. perniciosa com fenótipo de resistência aumentada a estrobilurinas. Este mutante representa uma importante ferramenta para elucidação de mecanismos de resistência a esta droga. Neste contexto, o projeto também propõe uma caracterização inicial desse mutante, visando à identificação das possíveis alterações genéticas associadas a este fenótipo. Assim, espera-se contribuir com o desenvolvimento de estratégias práticas para controle da vassoura de bruxa, as quais têm ainda o potencial de serem extrapoladas para o controle de outras doenças fúngicas que sejam baseadas em sistemas análogos de resistência a fungicidas.