Uma abordagem neuroproteômica do cérebro de operárias de Apis mellifera africanizadas submetidas ao ensaio de reflexo de extensão de probóscide

Resumo

Apis mellifera é um organismo caracterizado por apresentar um sistema nervoso estruturado de forma simples, com cerca de 950.000 neurônios, porém apresentam uma riqueza comportamental e uma impressionante capacidade cognitiva. Atualmente, as abelhas têm sido utilizadas como modelos de aprendizagem e memória, destacando a sua utilidade para a neurociência, em particular para o melhor entendimento das bases da cognição. Para aplicações em análise proteômica e análise peptidômica, abelhas são bons alvos por já terem seu genoma sequenciado. Entretanto, ainda há muito para se decifrar a nível molecular em termos de aprendizagem e formação de memória em abelhas. No presente estudo o comportamento de "reflexo de extensão da probóscide" (REP) será utilizado como estímulo de referência, para estudos proteômicos do cérebro de abelhas. Para isto, será utilizada: I) abordagem de proteômica shotgun em sistema LC-MS/IT-ToF para análise de proteínas solúveis; II) sistema LC-IT-ETD para análise de proteínas de membrana/receptores isoladas por meio de BN-PAGE para identificação de proteínas, e suas modificações pós-traducionais. As proteínas identificadas serão quantificadas por espectrometria de massas utilizando-se a estratégia label-free, a fim de se compreender a complexa rede neural e o processo de formação de memória a qual as abelhas serão submetidas; III) a estratégia de MALDI Imaging também será aplicada para as proteínas identificadas por espectrometria de massas e para alguns dos neuropeptídeos já descritos em literatura, visando compreender a distribuição destas macromoléculas nas diferentes estruturas do cérebro, colaborando com a compreensão da pergunta biológica do presente estudo. A partir das diferentes estratégias metodológicas aplicadas espera-se contribuir para a compreensão da neurociência em nível de proteínas e peptídeos, e seu papel nas interações moleculares e formação de memória de curto prazo em abelhas. (AU)