Análise proteômica confirmatória de um painel de biomarcadores seminais de alterações funcionais dos espermatozoides e de estresse oxidativo seminal

Resumo

A análise seminal convencional, utilizada rotineiramente durante a investigação de infertilidade conjugal, possui baixa sensibilidade e poder preditivo, tornando fundamental a identificação de novos métodos diagnósticos de infertilidade masculina. Tendo em vista que as alterações funcionais dos espermatozoides e o estresse oxidativo seminal são considerados os principais mecanismos associados à infertilidade, sua avaliação pode fornecer informação adicional sobre o potencial fértil masculino. Nesse sentido, um estudo anterior do nosso laboratório realizou a análise proteômica do plasma seminal de homens normozoospérmicos e identificou um painel de biomarcadores de alterações funcionais dos espermatozoides e de estresse oxidativo seminal. A fim de prosseguir com esse estudo, o objetivo deste projeto é validar esses biomarcadores como potencial método diagnóstico de alterações na atividade mitocondrial, de defeitos no acrossoma, de fragmentação do DNA dos espermatozoides e de altos níveis seminais de peroxidação lipídica. A validação será realizada em três coortes: (I) coorte de validação, com amostras seminais provenientes do estudo realizado anteriormente pelo nosso grupo e agrupadas de acordo com a integridade funcional dos espermatozoides e com o nível seminal de peroxidação lipídica (n=114), (II) coorte de confirmação prospectiva, com amostras de pacientes normozoospérmicos e sem fatores clínicos de infertilidade e (III) coorte de confirmação prospectiva em diferentes condições biológicas (varicocele, obesidade e tabagismo). Para a avaliação dos biomarcadores, serão utilizadas as técnicas de ELISA ou de western blot. Para as coortes prospectivas, a integridade funcional dos espermatozoides e o nível seminal de peroxidação lipídica também serão analisados. Para a comparação entre os grupos, será utilizado o teste t de Student para amostras não pareadas e análise estatística multivariada. Com esses resultados, espera-se identificar biomarcadores seminais efetivos de alterações funcionais dos espermatozoides e de estresse oxidativo seminal, os quais poderão ser utilizados no diagnóstico de infertilidade masculina. (AU)