Mapeamento e estudo de QTLs relacionados à robustez da levedura industrial Pedra-2 (Saccharomyces cerevisiae)

Resumo

O reconhecimento das consequências ambientais advindas da utilização dos combustíveis fósseis demanda o aumento significativo da produção de combustíveis renováveis, sendo o bioetanol considerado uma das principais alternativas. Neste contexto, leveduras industriais têm atraído a atenção de diversos grupos de pesquisas e empresas de biotecnologia, por serem consideradas excelentes backgrounds para o desenvolvimento de novos produtos. Entre as leveduras industriais destaca-se a Pedra-2 (PE-2), linhagem amplamente utilizada na produção brasileira de etanol, por apresentar uma alta produtividade no ambiente industrial e a capacidade de tolerar estresses oxidativo e por temperatura, tipicamente encontrados na indústria. Embora a análise genômica da linhagem PE-2 tenha demonstrado a presença de genes relacionados à estresses, as bases genéticas de sua robustez ainda não foram claramente entendidas, de forma que o estudo detalhado de quantitative trait loci (QTLs) relacionados à tolerância ao estresse oxidativo e por temperatura irão contribuir significativamente para a compreensão desses mecanismos e consequentemente para o contínuo desenvolvimento de linhagens mais produtivas. Um alto número de segregantes derivados da linhagem PE-2 (ou do híbrido PE2 x S288c) serão obtidos por citometria de fluxo utilizando o método de análise high-throughput de tétrades. Em seguida todos os segregantes serão individualmente avaliados sob as condições de estresse utilizando procedimento padronizados para high-throughput screening. Os segregantes identificados como tolerantes serão sequenciados e os QTLs serão mapeados por meio de análises de bioinformática e estatística. QTLs potencialmente relacionados à robustez serão validados utilizando o método de hemizigosidade recíproca.