Análise comparativa de diferentes sistemas de cultivo tridimensionais para o estabelecimento de um modelo in vitro de câncer de bexiga para testes citotoxicológicos

Resumo

A cultura de células de mamíferos é uma importante ferramenta para a predição da atividade, metabolismo e toxicidade in vivo de formulações terapêuticas. Praticamente todas as células no organismo encontram-se em um ambiente tridimensional (3D) que é fundamental para seu crescimento e metabolismo decorrente das interações célula-célula e célula-matriz. No entanto, no cultivo tradicional em monocamada (2D) tais interações são consideravelmente reduzidas. Esta característica é crítica para testes toxicológicos, uma vez que estímulos ambientais exercem efeito significativo nas propriedades, comportamentos e funções das células, o que pode afetar a resposta celular às substâncias testadas. Diante disso, cultivos celulares 3D, ao contrário dos cultivos 2D, são capazes de promover um microambiente que mimetiza aquele observado nos tecidos nativos. Portanto, este projeto foi proposto com o intuito de avaliar a utilização de diferentes formas de cultivo celulares tridimensionais (3D) como plataforma para testes citotóxicos in vitro utilizando como modelo células de câncer de bexiga (RT4) e os fármacos que vem sendo comumente utilizados para o tratamento deste tipo de câncer. Para isto serão estudados os cultivos na forma de esferoides em placas de baixa aderência e hanging drop, e cultivos baseados em scaffolds empregando microcarregadores, biomembranas e hidrogéis. Testes de citotoxicidade empregando os fármacos Doxorrubicina e Paclitaxel, comumente utilizados para o tratamento de câncer de bexiga, serão realizados nos sistemas 3D e 2D para fins comparativos com os obtidos para modelo in vivo. O melhor sistema para cultivo 3D será determinado levando em consideração os resultados de citotoxicidade e aspectos de cultivo como o tempo, complexidade, reprodutibilidade, custos e possibilidade de aplicação em plataformas de "high-throughput screening". (AU)