Caracterização do terpinen-4-ol sobre fungos e bactérias: avaliação do efeito sinérgico/aditivo, citotoxicidade, adesão em co-cultura e alteração dos fatores de virulência

Resumo

As infecções fúngicas e bacterianas bucais vem sendo cada vez mais descritas na literatura. Terapias alternativas para melhor controle microbiano estão sendo desenvolvidas particularmente para microrganismos resistentes. Extratos vegetais e compostos fitoquímicos abrem novas perspectivas para prevenção e controle eficiente das doenças infecciosas na busca de efeitos terapêuticos favoráveis. O Terpinen-4-ol é um monoterpeno que atua na indução da perda da membrana, interferindo na integridade e na fisiologia da célula do microrganismo e apresenta amplo espectro de atividade antimicrobiana e antinflamatória. Os objetivos deste estudo serão: i) avaliar a atividade sinérgica do Terpinen-4-ol e nistatina, o potencial citotóxico, sua propriedade antifúngica na forma de nanopartículas aplicados em células orais normais imortalizadas (NOK) e a adesão celular de Candida albicans após o tratamento com Terpinen-4-ol; ii) Verificar a ação antibacteriana e a expressão de fatores de virulência do Terpinen-4-ol sobre bactérias cariogênicas; iii) Analisar a descontaminação das superfícies de titânio sobre as propriedades de molhabilidade, energia livre de superfície, estrutura química e rugosidade. Biofilmes serão preparados usando-se o modelo de placa de microtitulação estática e avaliados pela viabilidade celular (teste de XTT), contagem das unidades formadoras de colônias (UFC/mL) e por microscopia confocal a laser. A atividade antimicrobiana do Terpinen-4-ol será determinada pelo método de microdiluição em caldo para as células planctônicas, os biofilmes serão avaliados pelo ensaio de XTT e a citotoxicidade sobre linhagem de células NOK será avaliada pelo ensaio da sulforodamida B (SRB) 0,1%. Adicionalmente, a microscopia eletrônica de varredura será utilizada para observação da arquitetura dos biofilmes e microscopia confocal a laser. Complementando os ensaios, o sinergismo do Terpinen-4-ol será avaliado pela metodologia do tabuleiro xadrez. Os protocolos de descontaminação das superfícies de titânio serão avaliados por microscopia de força atômica e espectroscopia de fotoelétrons de raios-X. (AU)