O uso de Holding time associado a protocolos de criopreservação do sêmen suíno.

Resumo

O projeto pretende verificar se curtos períodos de Holding time (período em que o espermatozoide permanece em contato com o plasma seminal à 17ºC antes de ser submetido a criopreservação a -196ºC) podem substituir longos períodos (24 horas). Para realização do experimento será coletado 6 amostras de 6 cachaços (n=36). Após análise inicial do sêmen (in natura), as amostras serão diluídas em BTS e divididas entre os seguintes tratamentos: T0 (centrifugado assim que diluído), T4 (4 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC), T8 (8 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC), T12 (12 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC) e T24 (24 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC). Após o holding time, as amostras serão centrifugadas (500 x g/ 10 min) e os pellets serão diluídos a uma concentração final de 300 x 106 espermatozoides/mL em diluidor para criopreservação do sêmen suíno. Posteriormente, será realizado o envase em palhetas de 0,5 mL e a criopreservação em sistema automático. Após a descongelação, as amostras serão analisadas quanto as características da motilidade (CASA), a integridade das membranas plasmática e acrossomal, o potencial de membrana mitocondrial e a fluidez dos lipídeos de membrana por citometria de fluxo. Os dados serão submetidos à análise dos modelos mistos (PROC MIXED), empregando-se o programa SAS (2002).