Avaliação do papel funcional de duas proteínas de Leptospira interrogans no processo de adesão do patógeno ao hospedeiro

Resumo

A leptospirose é uma zoonose de importância global recentemente incluída na lista das Doenças Tropicais Negligenciadas. Em áreas urbanas, os roedores desempenham o papel de principais reservatórios da doença por permitirem a colonização das leptospiras nos túbulos renais proximais e as excretarem vivas na urina. Não há vacina eficaz até o momento. A identificação de proteínas da membrana externa conservadas entre cepas patogênicas são os principais alvos de pesquisa para elucidar os mecanismos de patogenicidade. São estas proteínas que, provavelmente, estão envolvidas na interação das leptospiras com o ambiente externo, podendo também servir de alvo para o sistema imune do hospedeiro. Vários grupos de pesquisa têm buscado identificar e caracterizar proteínas de superfície que sejam antigênicas e conservadas nos diversos sorovares de Leptospira interrogans. Nesse sentido, o presente projeto propõe clonar e expressar duas preditas lipoproteínas de Leptospira codificadas pelos genes LIC12587 e LIC11711. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal e inoculadas em camundongos para avaliação da sua atividade imunogênica e obtenção de soros imunes. Estes soros serão utilizados como sonda para avaliar a presença de proteínas no extrato total de Leptospira spp. de diferentes sorovares a fim de estudarmos sua conservação e localização celular. As proteínas presentes em diferentes leptospiras patogênicas serão avaliadas quanto à reatividade com anticorpos em soros de pacientes diagnosticados com a doença e sua capacidade de interagir com componentes da matriz extracelular e do soro humano, para avaliação das mesmas no processo de adesão ao hospedeiro. (AU (AU)