Avaliação do papel funcional de proteínas de superfície de Leptospira interrogans como receptores de células endoteliais e epiteliais do hospedeiro

Resumo

A Leptospirose é uma zoonose amplamente disseminada e ocorre de forma endêmica em várias partes do mundo. No Brasil, as epidemias mais frequentes ocorrem nas comunidades pobres durante o período de chuvas, época em que os alagamentos constantes associados às condições precárias de saneamento favorecem o contato com ambiente e água contaminada. Medidas para controlar a propagação da doença são falhos. O entendimento dos mecanismos de patogenicidade das leptospiras é fundamental para bloquear a ação deste patógeno. Nesse sentido, a identificação de proteínas da membrana externa conservadas são os principais alvos de pesquisa, visto que essa localização de superfície facilita a interação com o hospedeiro. Diversos estudos têm buscado caracterizar o envolvimento de proteínas de superfície de Leptospira interrogans com componentes do hospedeiro. Assim, o projeto atual tem como proposta avaliar o envolvimento das proteínas LipL41, LipL21, Lip46 e OmpL37 como receptores de células endoteliais e epiteliais in vitro. Os genes clonados serão expressos em linhagens de E. coli. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal e analisadas quanto a sua estrutura pela técnica de dicroísmo circular. Animais BALB/c serão imunizados com as proteínas recombinantes para produção de antissoro policlonal e os soros obtidos serão titulados por ELISA. Em seguida, as proteínas recombinantes serão avaliadas quanto à reatividade com anticorpos presentes nos soros de pacientes diagnosticados com Leptospirose e suas interações com células endoteliais e epiteliais serão caracterizadas in vitro. O cumprimento dessas etapas experimentais irá contribuir para a identificação de proteínas envolvidas na interação patógeno-hospedeiro. (AU)