Cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas em Tandem no modo column switching para a determinação de endocanabinoides e canabinoides em amostras biológicas de pacientes com a Doença de Parkinson

Resumo

Os endocanabinoides (eCBs) são neurotransmissores, derivados do ácido araquidônico, que se ligam a receptores canabinoides e participam de diversas funções cerebrais, incluindo o controle motor. Em razão desta correlação, as alterações do sistema endocanabinoide de pacientes com a Doença de Parkinson (DP) têm sido avaliadas através da determinação das concentrações de anandamida (AEA) e do 2-araquidonoilglicerol (2AG), principais eCBs, em amostras biológicas. Recentemente, o canabidiol (CBD), derivado da Cannabis sativa, tem sido avaliado no tratamento da DP em pacientes com sintomas psicóticos. A cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em Tandem (LC-MS/MS) tem sido considerada a técnica analítica de referência para a determinação de endocanabinoides e canabinoides em amostras biológicas. A LC-MS/MS no modo column switching permite a automação das análises através da hifenação da etapa de preparo de amostras biológicas (pré-concentração dos analitos e remoção de grande parte dos componentes endógenos) com o sistema cromatográfico (separação cromatográfica e detecção), reduzindo o tempo da análise, o volume das amostras biológicas e de solventes orgânicos, e aumentando a seletividade e detectabilidade analítica. Neste projeto, o método online empregando a cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas em Tandem (UHPLC-MS/MS) no modo column switching foi desenvolvido para a determinação de AEA e 2AG em amostras de plasma e liquor de pacientes com a DP. Como objetivos futuros, o método online UHLC-MS/MS no modo column switching, com a coluna MIP monolítica na primeira dimensão e fase reversa na segunda dimensão será desenvolvido para análise de CBD e 9-THC em amostras de plasma de pacientes com a DP em terapia com CBD. Avaliaremos as alterações no sistema endocanabinoide (AEA e 2 AG) na DP, e se o uso do canabidiol poderá modificar os níveis destas substâncias. As doses de canabidiol (CBD) administradas serão correlacionadas com as concentrações plasmáticas de CBD e de delta 9-tetrahidrocanabidiol (delta 9-THC) determinadas em amostras de pacientes com DP. (AU)