Avaliação da influência de fibroblastos sobre a maturação e indução de cardiomiócitos com potencial arritmogênico

Resumo

As doenças cardiovasculares correspondem atualmente às principais causas de morte no mundo. O transplante de células-tronco e/ou cardiomiócitos diferenciados in vitro tem sido utilizado no estudo da terapia celular como forma de regeneração e reparo cardíaco. No entanto, os cardiomiócitos derivados de células tronco apresentam características imaturas quanto a capacidade contrátil e de condução de potenciais de ação, além de estarem relacionados com o surgimento de arritmias pós-transplante celular.Durante a minha iniciação científica, nós observamos que os fibroblastos cardíacos aumentam a expressão dos fatores de transcrição Nkx2.5 e Gata-4, a expressão das conexinas-40 e 43 e alteram o perfil dos transientes de cálcio intracelular em cardiomiócitos. Nossos dados, juntamente com os da literatura, sustentam a hipótese de que os fibroblastos desempenham um papel na indução de células de condução rápida, características do sistema de condução ventricular, e que este processo pode estar diretamente relacionado ao surgimento de arritmias pós-transplante celular em modelos de infarto do miocárdio. Para testar esta hipótese, assim como propor estratégias a fim de melhorar a eficiência das terapias celulares para doenças cardíacas, utilizaremos cardiomiócitos derivados de células iPS humanas e fibroblastos cardíacos humanos. Iremos padronizar diferentes culturas e co-culturas celulares com a finalidade de avaliar a interação de cardiomiócitos e fibroblastos, assim como inibir e selecionar negativamente células arritmogênicas, por meio da geração de knockdown/knockout para Nkx2.5/Irx3 e FACS Sorting para Conexina-40, respectivamente. Portanto, o presente projeto tem por Objetivo geral: Avaliar a influência de fibroblastos sobre a maturação e indução de cardiomiócitos com potencial arritmogênico. (AU)