Efeito de mutações em TrkA associadas à CIPA nas vias de sinalização da dor e no desenvolvimento dos neurônios nociceptivos

Resumo

A ativação do receptor Tropomyosin-Related Kinase A (TrkA/NTRK1) pelo fator de crescimento nervoso (NGF) inicia a sinalização de dor e é um importante alvo de terapias alternativas ao uso de opióides, que podem causar vício. Além disso, a ativação do eixo TrkA/NGF é essencial para o desenvolvimento embrionário dos Gânglios da Raiz Dorsal (GRDs), que abrigam os corpos celulares dos neurônios nociceptivos responsáveis pela sensação de dor. Pacientes com Insensibilidade Congênita à Dor e Anidrose (CIPA, do inglês Congenital Insensitivity to Pain with Anhidrosis) apresentam mutações no gene NTRK1 e, em alguns casos, defeitos no desenvolvimento de nervos nociceptivos e simpáticos. Neste projeto, visamos avaliar a importância de mutações encontradas em CIPA para o papel da TrkA na função e desenvolvimento dos neurônios nociceptivos. Para isso, usaremos células que expressam TrkA selvagem ou mutada para quantificar e comparar sua cinética de fosforilação, a ativação de seu parceiro PLC-gamma e a liberação de cálcio intracelular. No desenvolvimento embrionário, estudaremos a formação dos GRDs em embriões de galinha superexpressando TrkA selvagem ou mutada. Estes resultados serão usados para o desenho de peptídeos sintéticos para bloquear a interação entre TrkA e PLC-gamma, e validaremos sua atividade in vitro e in vivo. Nossos resultados apoiarão conclusões sobre da importância de sítios específicos da TrkA para a sinalização da dor e formação dos GRDs e poderão informar o desenvolvimento de novas terapias para a dor baseadas no bloqueio de interações específicas. (AU)