Avaliação anti-inflamatória, antioxidante e antimicrobiana do sistema multiparticulado mucoadesivo contendo substância natural

Resumo

A periodontite é uma das doenças mais prevalentes no mundo, caracterizada por uma resposta inflamatória desregulada e excessiva. Foi amplamente demonstrado que as substâncias naturais têm propriedades anti-inflamatórias e antimicrobianas e, portanto, potencial para uso no tratamento da periodontite. No entanto, um dos principais desafios no uso dessas substâncias naturais é sua estabilidade limitada, são facilmente degradadas e apresentam baixa solubilidade, limitando o uso terapêutico. Para solucionar esse problema, desenvolvemos sistemas mucoadesivos multiparticulados, para liberação controlada das substâncias naturais (morina e carvacrol), aumentando assim seu potencial terapêutico. Este projeto de pesquisa tem como objetivo avaliar a atividade anti-inflamatória, antioxidante e antimicrobiana desses sistemas mucoadesivos, frente a patógenos periodontais. Será utilizado um modelo bem estabelecido de linha celular de queratinócitos orais H400 que será exposto a bactérias patogênicas periodontais (P. gingivalis e F. nucleatum) por 24 h. As células serão pré-tratadas com o sistema escolhido e seu respectivo controle. Após incubação, os meios celulares serão testados com citocinas inflamatórias por ELISA. Os níveis de expressão gênica dos inflamassomas NLRP3 e IL-1² serão avaliados por RT - PCR e Western Blot. Para a capacidade antioxidante, neutrófilos isolados do sangue venoso periférico de voluntários com doença periodontal e sistemicamente saudáveis serão estimulados por P. gingivalis e F. nucleatum não viáveis e será determinada a capacidade do sistema escolhido em reduzir a produção extracelular e total de espécies reativas de oxigênio. Para avaliação antimicrobiana, biofilme e suspensão de P. gingivalis e F. nucleatum, serão tratados com o sistema escolhido. O efeito inibitório do sistema para os microrganismos em suspensão será avaliado por meio da turbidez e quanto unidade formadora de colônia (UFC). Um ensaio de coloração live/dead e UFC serão utilizados para determinar o efeito do sistema na viabilidade bacteriana em biofilmes maduros. (AU)