Efeito de probiótico Lactobacillus acidophilus LA5 sobre a expressão de proteínas relacionadas à integridade da barreira intestinal em modelo de periodontite induzida por Aggregatibacter actinomycetemcomitans

Resumo

A periodontite é uma doença inflamatória multifatorial crônica associada a um biofilme disbiótico que leva à destruição progressiva dos tecidos de suporte do dente, sendo um dos principais causadores da perda dentária. Estudos prévios in vitro e in vivo, realizados neste laboratório, mostraram o potencial da cepa probiótica Lactobacillus acidophilus LA5 em afetar a colonização oral e modular a resposta imunológica local e sistêmica ao patógeno periodontal Porphyromonas gingivalis. Também pudemos demonstrar que está cepa é capaz de alterar a expressão de fatores de virulência do periodontopatógeno A. actinomycetemcomitans e de inibir a sua adesão a células epiteliais gengivais e modificar a resposta destas células ao patógeno. A periodontite é associada não somente à disbiose oral, mas também à disbiose intestinal, sendo esta um dos mecanismos envolvidos na inflamação sistêmica, visto que patógenos periodontais foram associados a maior permeabilidade intestinal. Este aumento deve-se à redução da produção de muco e das proteínas de junção (TJs). Estudos em humanos evidenciaram alteração do microbioma intestinal em pacientes com periodontite agressiva portadores de altos níveis orais de A. actinomycetemcomitans, sendo que este patógeno produz uma exotoxina presente em vários patógenos causadores de alteração da permeabilidade intestinal e diarreia. O presente estudo visa testar a hipótese de que o probiótico Lactobacillus acidophilus LA5 é capaz de controlar a alteração da barreira epitelial do intestino induzida pela inoculação oral experimental de A. actinomycetemcomitans em modelo murino. Camundongos C57Bl/6 serão alocados em 4 grupos, sendo 12 animais por grupo: - Controle positivo, que será infectado com A. actinomycetemcomitans. Controle negativo: não infectado. Controle Probiótico: infectado apenas com L. acidophilus LA5, e Experimental: Infectado com A. actinomycetemcomitans e L. acidophilus LA5. Após o período experimental de 30 dias, os animais serão eutanasiados e serão determinados a reabsorção do osso alveolar por microtomografia computadorizada (microCT). A expressão de genes associados à permeabilidade da barreira epitelial do intestino será determinada por RT-qPCR e os níveis séricos de LPS pelo método de Limulus A detecção de A.actinomycetemcomitans no intestino e no biofilme oral. será realizada por PCR quantitativo.