Construção e seleção de uma biblioteca de anticorpos monoclonais scFv contra a proteína spike do SARS-CoV-2 pela tecnologia de Phage Display

Resumo

Os anticorpos contra SAR-CoV-2 são moléculas-chave para a compreensão e combate a pandemia de COVID-19. Eles desempenham algumas funções, tais como: eliminação do vírus de pacientes infectados, reagente chave para diagnósticos rápidos, primeira linha de tratamento para pacientes hospitalizados e são o principal objetivo do desenvolvimento das vacinas. As vacinas e anticorpos terapêuticos disponíveis atualmente foram desenvolvidos a partir da proteína spike de variantes do SARS-CoV-2 que circulavam durante as primeiras fases da Pandemia em 2020. O surgimento de novas variantes, a partir de mutações no sítio de ligação do receptor (RBD) da proteína spike, tem gerado preocupações sobre o comprometimento das respostas de anticorpos neutralizantes e a eficácia de programas de vacinação. Neste contexto, o objetivo desta proposta é a geração de anticorpos monoclonais contra a proteína spike da variante brasileira P.1 para imunoterapia e prevenção da COVID-19. Os anticorpos serão selecionados contra a proteína spike a partir de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos scFv utilizando a tecnologia de Phage display. Após a seleção, os anticorpos mais reativos serão produzidos no formato scFv-Fc em células de mamífero, e posteriormente, será realizada a caracterização funcional desses anticorpos como, por exemplo, a análise do potencial neutralizante dos anticorpos com relação ao vírus e também análises in silico para caracterização da interação antígeno-anticorpo. Espera-se que este estudo seja capaz de fornecer um banco de anticorpos neutralizantes ao vírus SARS-CoV-2 que possam contribuir para o desenvolvimento de imunoterapias efetivas no manejo clínico de pacientes com COVID-19 em futuro breve. (AU)