Avaliação da entrega de seriniquinona para células de melanoma por nanopartículas de poli (D,L-ácido láctico-co-ácido glicólico) (PLGA)

Resumo

A seriniquinona (SQ) e seus derivados compreendem um grupo de substâncias com potente atividade citotóxica, mostrando seletividade para linhagens de melanoma. Essas substâncias apresentam um mecanismo de ação novo e distinto de outras quinonas, através da ligação à proteína dermicidina (DCD) e da deflagração de autofagocitose e apoptose. Um dos desafios para o avanço da SQ nos estudos de suas propriedades anticâncer é a sua baixa solubilidade em água, o que estimulou o desenvolvimento de formulações baseadas em nanopartículas de poli (D,L-ácido láctico-co-ácido glicólico) (PLGA-NPs) para dispersão em veículos aquosos. As PLGA-NPs desenvolvidas demonstraram ter características ideais para administração e manutenção de atividade citostática e citotóxica com encapsulação. Assim sendo, com o presente projeto, objetiva-se compreender as interações célula-nanocarreador, utilizar modelos in vitro mais robustos e verificar a manutenção da interação SQ-DCD, seu alvo molecular, com a nanoencapsulação. Para observar os mecanismos de internalização e tráfego intracelular das NPs, propõe-se utilizar citometria de fluxo e microscopia confocal. Para mimetizar o microambiente tumoral, serão utilizados modelos de esferoides de melanoma, e em cocultura com fibroblastos e macrófagos, os quais serão avaliados para citotoxicidade e penetração de NPs por microscopia confocal. Para avaliar a citotoxicidade e a capacidade de inibição do crescimento e invasão tumoral, será feita coloração com hematoxilina e eosina (H&E) dos cortes histológicos de modelo de pele humana reconstituída in vitro após tratamento. Para verificar a manutenção da interação com a DCD com a SQ após a encapsulação, serão utilizadas as técnicas de RT-qPCR e Western blot para análise da modulação gênica e proteica.