Estudo das diferencas genomicas entre amostras autoctones de herpesvirus bovino tipo 1 e tipo 5 pela tecnica do mapeamento por enzimas de restricao (rflp).

Resumo

Objetiva-se no presente projeto analisar as diferenças genômicas entre o Herpesvirus Bovino tipo 1(BHV-1), vírus da Rinotraqueíte Infecciosa Bovina/Vulvovaginite Pustular Infecciosa, e o Herpesvirus Bovino tipo 5 (BHV-5), causador da Encefalite Herpética em bovinos. Amostras tidas com padrão para esses dois tipos virais serão comparadas com amostras de herpesvirus isoladas de bovinos no Brasil, através da técnica do mapeamento por enzimas de restrição ou "restriction fragment length polymorfism" (RFLP). Após multiplicação e titulação das amostras virais, garrafas rolantes de cultivo celular (450 cm2) com células da linhagem MDBK (Madin-Darby bovine kidney) serão infectadas para a produção dos antígenos de cada amostra. Após a purificação do antígeno, o DNA genômico viral será extraído e digerido pelas enzimas de restrição Bam HI, Eco RI, Hind III e Pst I. Os fragmentos obtidos no RFLP serão visualizados após eletroforese em gel de agarose e coloração por brometo de etídio, sob transiluminação ultravioleta. Os perfis de restrição enzimática encontrados serão comparados com os padrões descritos na literatura, para se verificar a quais tipos e subtipos pertencem às amostras autóctones de herpesvírus isolados. (AU)