Estudos estruturais e cinéticos da enzima purina nucleosídeo fosforilase de Schistosoma mansoni

Resumo

O Schistosoma mansoni, parasita responsável pela esquistossomose, doença que afeta cerca de 300 milhões de pessoas em todo mundo, não possui a via de síntese de purinas ou via "de novo", dependendo integralmente da via de salvação de purinas para seu suprimento de bases de purina. No Projeto Genoma de Schistosoma mansoni o Edna para a enzima Purina Nucleosídeo Fosforilase (PNP) foi identificado. Esta enzima é uma das participantes da via de salvação de purinas. Este gene foi totalmente seqüenciado e clonado no vetor de expressão pMAL. Após a clivagem da proteína de fusão com Fator Xa a SmPNP foi purificada utilizando uma coluna de troca catiônica (Poros 20SP). A SmPNP assim purificada e ativa para inosina e guanosina. Duas condições de cristalização se mostraram promissoras para a obtenção de monocristais da SmPNP. Os objetivos principais deste projeto de doutorado são a determinação experimental da estrutura tridimensional da SmPNP, por difração de raios X, com posterior resolução de estrutura cristalográfica empregando o método de substituição molecular, como também a total caracterização cinética da SmPNP. Ainda serão realizadas buscas por compostos naturais que inibam a SmPNP. A conclusão destes objetivos nos permitirá avaliar a SmPNP como um possível alvo quimioterápico na esquistossomose. (AU)