UHPLC-MS/MS Method for Determination of Hydroxychloroquine and Its Main Metabolites in Oral Fluid and Whole Blood for Therapeutic Drug Monitoring

Autor(es)

Duarte, Nilo J. C. ^{[1, 2]} ; Kupa, Leonard V. K. ^[3] ; Ferreira-Filho, Julio C. R. ^[3] ; Fontoura, Nicole ^[3] ; Chalom, Marc Y. ^[1] ; Romano, Paschoalina ^{[1, 2]} ; Ebner, Persio A. R. ^{[1, 2]} ; Silva, Clovis A. A. ^[3] ; Carvalho, Valdemir M. ^[4] ; Bonfa, Eloisa ^[3]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Univ Sao Paulo, Hosp Clin HCFMUSP, Fac Med, Cent Lab Div, Sao Paulo, SP - Brazil

^[2] Univ Sao Paulo, Hosp Clin HCFMUSP, Fac Med, Lab Invest Med LIM 03, Sao Paulo, SP - Brazil

^[3] Univ Sao Paulo, Rheumatol Div Hosp Clin HCFMUSP, Fac Med, Sao Paulo, SP - Brazil

^[4] Grp Fleury, Sao Paulo, SP - Brazil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: JOURNAL OF APPLIED LABORATORY MEDICINE; v. 6, n. 4, p. 868-880, JUL 2021.
• Citações Web of Science: 0

Resumo

Background: Hydroxychloroquine (HCQ) blood levels are used to monitor efficacy, safety, and patient adherence during treatment. Oral fluid has emerged as an alternative noninvasive, easily accessible, and low-complexity matrix for drug monitoring. However, there is no analytical method to measure HCQ in oral fluid. Therefore, we developed and validated an ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass (UHPLC-MS/MS) method for the measurement of HCQ and its main metabolites in oral fluid and compared to whole blood. Methods: Ten microliters of matrices were used for sample preparation by protein precipitation with acetonitrile followed by online solid phase extraction. The validation process included assessment of lower limit of quantification, linearity, precision, recovery, matrix effect, interferences assessment, carryover, and sample dilution validation. Results: The lower limit of quantification was 50 ng/mL for HCQ and metabolites in both oral fluid and whole blood. The calibration curve was linear from 50 to 2000 ng/mL (r(2) = 0.999). The coefficient of variation for precision assay was 1.2% to 9.7% for intraday and 1.1% to 14.2% for interday for both HCQ and metabolites in oral fluid and whole blood samples at 150, 750, and 1250 ng/mL. The recovery was 85.3% to 118.5% for 150, 750, and 1250 ng/mL of HCQ and metabolites in both oral fluid and whole blood. Dilution factor up to 5-fold was validated for concentrations higher than the upper limit of quantification. Conclusions: The validated method is specific, precise, and accurate to determine the analytical range for therapeutic monitoring of HCQ and its main metabolites in oral fluid and blood. (AU)

• Processo FAPESP: 15/03756-4 - Avaliação da relevância dos níveis sanguíneos de drogas utilizadas em doenças autoimunes reumatológicas no acompanhamento da segurança, eficácia e aderência à terapêutica
• Beneficiário: Eloisa Silva Dutra de Oliveira Bonfá
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 17/11644-7 - Níveis sanguíneos e salivares de hidroxicloroquina: relevância na atividade de doenças do lúpus eritematoso sistêmico juvenil (LESJ), na atividade doença renal no LES adulto e na produção de interferon-alfa/TNF por células dendríticas plasmocitoides media
• Beneficiário: Nicole Andressa Gomes Fontoura
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Processo FAPESP: 17/11516-9 - Avaliação da relevância dos níveis sanguíneos de drogas utilizadas em doenças autoimunes reumatológicas no acompanhamento da segurança, eficácia e aderência à terapêutica
• Beneficiário: Julio Cesar Rente Ferreira Filho
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 19/17272-0 - Avaliação da relevância dos níveis sanguíneos de drogas utilizadas em doenças autoimunes reumatológicas no acompanhamento da segurança, eficácia e aderência à terapêutica
• Beneficiário: Leonard de Vinci Kanda Kupa
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 17/03983-6 - Sistema de cromatografia líquida e espectrometria de massa no processo 2015/03756-4
• Beneficiário: Eloisa Silva Dutra de Oliveira Bonfá
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários