Spatiotemporal Quantification of Cytosolic pH in Arabidopsis Pollen Tubes

Autor(es)

Portes, Maria Teresa ^{[1, 2]} ; Damineli, Daniel S. C. ^[2] ; Feijo, Jose A. ^[2]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Univ Sao Paulo, Inst Biociencias, Dept Bot, Sao Paulo - Brazil

^[2] Univ Maryland, Cell Biol & Mol Genet Dept, College Pk, MD 20742 - USA

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: BIO-PROTOCOL; v. 11, n. 14 JUL 20 2021.
• Citações Web of Science: 0

Resumo

Ion-specific probes and fluorescent indicators have been key in establishing the role of ion signaling, namely calcium, protons, and anions, in plant development, providing a robust approach for monitoring spatiotemporal changes in intracellular ion dynamics. The integration of protons/pH in signaling mechanisms is especially important as reports of their biological functions continue to expand; however, attaining quantitative estimates with high spatiotemporal resolution in single cells poses a major research challenge. Here, we detail the use of the genetically encoded pH-sensitive pHluorin reporter expressed in Arabidopsis thaliana pollen tubes to assess cytosolic measurements with calibration to provide actual pH values. This technique enabled us to identify critical phenotypes and establish the importance of tip-focused pH gradient for pollen tube growth, although it can be adapted to other experimental systems. (AU)

• Processo FAPESP: 19/26129-6 - A saga de um tubo polínico para encontrar o óvulo: regulação iônica espaço-temporal como mecanismo de crescimento apical e direcionamento em células individuais
• Beneficiário: Maria Teresa Portes
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Processo FAPESP: 19/23343-7 - Análise temporal da expressão gênica
• Beneficiário: Daniel Santa Cruz Damineli
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 15/22308-2 - Representações intermediárias em Ciência Computacional para descoberta de conhecimento
• Beneficiário: Roberto Marcondes Cesar Junior
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 21/05363-0 - A saga de um tubo polínico para encontrar o óvulo: regulação iônica espaço-temporal como mecanismo de crescimento apical e direcionamento em células individuais
• Beneficiário: Maria Teresa Portes
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Jovens Pesquisadores