Perfil de IL-6 e TNF na Formação de Células Espumosas: Um Método Aprimorado Usando a Sonda de Isotiocianato de Fluoresceína (FITC)

Autor(es)

Cynthia Aparecida Castro ; Tereza Cristina Buzinari ^[2] ; Rafael Luis Bressani Lino ^[3] ; Heloisa Sobreiro Selistre de Araújo ^[4] ; Fernanda de Freitas Aníbal ^[5] ; Roberto Mario Machado Verzola ^[6] ; Vanderlei Salvador Bagnato ^[7] ; Natalia Mayumi Inada ^[8] ; Gerson Jhonatan Rodrigues ^[9]

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Arquivos Brasileiros de Cardiologia; 2022-08-05.

Resumo

Resumo Fundamento A formação de células espumosas ocorre devido ao aumento em lipoproteína plasmática de baixa densidade (LDL) e desregulação da inflamação, sendo importante para o desenvolvimento da aterosclerose. Objetivo Avaliar o perfil do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e da interleucina-6 (IL-6) no método de formação da célula espumosa existente, otimizando esse protocolo. Métodos A LDL foi isolada, oxidada e marcada com sonda de isotiocianato de fluoresceína (FITC). As células espumosas foram geradas de célula derivada de monócitos humanos THP-1 e incubadas na ausência (controle) ou presença de FITC-ox-LDL (10, 50, 100, 150 ou 200 μg/mL), por 12, 24, 48 ou 72 horas. A FITC-ox-LDL na célula foi quantificada por microscopia. O ensaio de imunoabsorção enzimática foi avaliado para quantificar a IL-6 e o TNF-α, com um p <0,05 considerado significativo. Resultados Todas as concentrações de FITC-ox-LDL testadas apresentaram fluorescência mais alta em comparação com o controle, demonstrando maior acúmulo de lipoproteínas nas células. Quanto mais alta a concentração de FITC-ox-LDL, maior a produção de TNF-α e IL-6. A produção de IL-6 pelas células espumosas foi detectada até o valor de 150 µg/mL da LDL máxima de estímulo. Concentrações acima de 50 μg/mL de LDL estimularam maior liberação de TNF-α comparado ao controle. Conclusões Nosso modelo contribui para o entendimento da liberação de IL-6 e TNF-α em resposta a várias concentrações de ox-LDL usando o método otimizado para a formação de células espumosas. (AU)

• Processo FAPESP: 18/10588-9 - Caracterização do efeito hipotensivo da fotobiomodulação em diferentes modelos animais de hipertensão arterial e estratégias farmacológicas para potencialização deste efeito
• Beneficiário: Gerson Jhonatan Rodrigues
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular