Autor(es)

Camargo, Suelen ; Mulinari, Evandro J. ; de Almeida, Leonardo R. ; Bernardes, Amanda ; Prade, Rolf A. ; Garcia, Wanius ; Segato, Fernando ; Muniz, Joao R. C.

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS; v. 1868, n. 12, p. 12-pg., 2020-12-01.

Resumo

The fungus Thermothielavioides terrestris plays an important role in the global carbon cycle with enzymes capable of degrading polysaccharides from biomass, therefore an attractive source of proteins to be investigated and understood. From cloning to a three-dimensional structure, we foster a deeper characterization of an alpha-L-arabinofuranosidase, a glycoside hydrolase from the family 62 (TtAbf62), responsible to release arabinofuranose from non-reducing ends of polysaccharides. TtAbf62 was tested with synthetic (pNP-Araf) and polymeric substrates (arabinan and arabinoxylan), showing optimal temperature and pH (for pNP-Araf) of 30 degrees C and 4.5-5.0, respectively. Kinetic parameters revealed different specific activity for the three substrates, with a higher affinity for pNP-Araf (K-M: 4 +/- 1 mM). The hydrolyzing activity of TtAbf62 on sugarcane bagasse suggests high efficiency in the decomposition of arabinoxylan, abundant hemicellulose presented in the sugarcane cell wall. The crystal packing of TtAbf62 reveals an exquisite domain swapping, located at the supramolecular arrangement through a disulfide bond. All crystallographic behaviors go against its monomeric state in solution, indicating a crystal-induced artifact. Structural information will form the basis for further studies aiming the development of optimized enzymatic properties to be used in biotechnological applications. (AU)

• Processo FAPESP: 17/16291-5 - Caracterização biofísica-estrutural de enzimas termofílicas prospectadas do fungo Thielavia terrestris para degradação de biomassa e geração de produtos biotecnológicos
• Beneficiário: João Renato Carvalho Muniz
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 16/09152-6 - Estudo estrutural e funcional de hidrolases de glicosídeos celulossomais termofílicas envolvidas no processo de hidrólise de biomassa lignocelulósica
• Beneficiário: Leonardo Rodrigues de Almeida
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Processo FAPESP: 14/18714-2 - Oxidação enzimática do bagaço de cana-de-açúcar: descoberta, caracterização e aplicação de novas enzimas oxidativas de carboidratos, voltadas para o desenvolvimento de um cell factory mais eficiente
• Beneficiário: Fernando Segato
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOEN - Jovens Pesquisadores
• Processo FAPESP: 14/50897-0 - INCT 2014: Centro de Química Medicinal de Acesso Aberto
• Beneficiário: Katlin Brauer Massirer
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 19/22284-7 - Caracterização bioquímica, funcional e aplicação de monoxigenases líticas de polissacarídeos identificadas em estudos de transcriptoma e secretoma de fungos filamentosos cultivados em bagaço de cana
• Beneficiário: Fernando Segato
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOEN - Regular
• Processo FAPESP: 17/50025-0 - Development of lignin active enzyme mixture to produce sugars from lignocellulosic biomass for production of fuels, chemicals and bio based materials
• Beneficiário: Fernando Segato
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular