| Texto completo | |
| Autor(es): |
Gomes, Brisa Moreira
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de Oliveira, Gabriel Stephani
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de Melo, Vandierly Sampaio
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Rossini, Nicolas de Oliveira
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Adriani, Patricia Pereira
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Dias, Marcio Vinicius Bertacine
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Chambergo, Felipe S.
Número total de Autores: 7
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| Tipo de documento: | Artigo Científico |
| Fonte: | International Journal of Biological Macromolecules; v. 329, p. 13-pg., 2025-11-01. |
| Resumo | |
The pursuit of sustainable energy has intensified the search for efficient biocatalysts to convert lignocellulosic biomass. In this context, we characterized a novel bifunctional enzyme, TerARA, identified from the gut metagenome of the termite Pseudacanthotermes militaris. Belonging to the glycoside hydrolase 43 (GH43) family, TerARA was heterologously expressed in E. coli BL21 and purified. The enzyme demonstrated bifunctional activity toward synthetic substrates p-nitrophenyl-alpha-L-arabinofuranoside (pNP-Araf) (387.22 +/- 74.2 U/mg) and p-nitrophenyl-R-D-xylopyranoside (pNP-Xyl) (330.82 +/- 31.2 U/mg), with higher catalytic efficiency for pNP-Araf (9.14 s-1 & sdot;mM-1), suggesting functional preference as an alpha-L-arabinofuranosidase. Activity modulation by metal ions revealed that Ca2+ slightly improved efficiency toward pNP-Araf (to 9.58 s-1 & sdot;mM-1 at 1 mM), while Zn2+ reduced efficiency for pNP-Xyl except at 5 mM (6.65 s-1 & sdot;mM-1). Zn2+ also enhanced enzymatic stability, maintaining 80 % activity in pNP-Xyl hydrolysis. Crystallographic analysis at 2.0 & Aring; resolution revealed a 43 Glycosyl Hydrolase catalytic domain with a five-bladed R-propeller fold and two Ca2+ ions and a Carbohydrate-Binding Module (CBM) domain with a R-sandwich fold likely involved in substrate interaction. Conserved catalytic residues, binding sites, and Ca2+ stabilizing effects were identified. TerARA's bifunctionality and structural features support its application in hemicellulose degradation and biomass conversion. (AU) | |
| Processo FAPESP: | 22/12234-5 - Resistência a antimicrobianos em Mycobacterium tuberculosis: análise estrutural, biofísica e bioquímica de mutações missense |
| Beneficiário: | Marcio Vinicius Bertacine Dias |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Processo FAPESP: | 18/00351-1 - Biologia Estrutural aplicada às enzimas envolvidas na biossíntese de produtos naturais: aplicações biotecnológicas e entendimento molecular de reações enzimáticas pouco usuais |
| Beneficiário: | Marcio Vinicius Bertacine Dias |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Processo FAPESP: | 21/10577-0 - Centro de Pesquisa em Biologia de Bactérias e Bacteriófagos (CEPID B3) |
| Beneficiário: | Shaker Chuck Farah |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Centros de Pesquisa, Inovação e Difusão - CEPIDs |
| Processo FAPESP: | 17/25705-8 - Estudo e caracterização de enzimas para degradação de biomassa |
| Beneficiário: | Felipe Santiago Chambergo Alcalde |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Processo FAPESP: | 17/23627-0 - Determinação das bases estruturais da formação biosintética de anéis heterocíclicos em poliéteres ionóforos |
| Beneficiário: | Gabriel Stephani de Oliveira |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Processo FAPESP: | 21/14205-0 - Determinação das bases estruturais dos mecanismos de resistência baseado em mutações missenses em Mycobacterium tuberculosis à antimicrobianos de primeira e segunda linha |
| Beneficiário: | Nicolas de Oliveira Rossini |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado Direto |