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Lima, Lidia dos Passos ; Sriranganadane, Dev ; da Silva, Daiane Laise ; Drebes Dorr, Natalia C. ; Mello, Enzo Breviglieri Sichi ; Dos Reis, Caio Vinicius ; Lourenco, Rogerio Ferreira ; Santos, Jose Felipe Teixeira da Silva ; Salmazo, Anita ; Miranda, Brenno Wendler ; Massirer, Katlin B. ; Counago, Rafael M. ; Alvarez-martinez, Cristina E.
Número total de Autores: 13
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: FEBS Journal; v. N/A, p. 22-pg., 2026-01-08.
Resumo

Serine/threonine (Ser/Thr) kinases of the Hanks-type family are widespread in bacteria, playing key roles in signal transduction. The transmembrane Ser/Thr kinase PknS (XAC4127) from the phytopathogenic bacterium Xanthomonas citri is required for the expression of a type VI secretion system, which confers resistance to predation by the soil amoeba Dictyostelium discoideum. PknS exerts its function via activation of the cognate ECF-type alternative sigma factor EcfK, ultimately triggering the expression of type VI secretion system (T6SS) genes. In this study, we characterize PknS, demonstrating its ability to undergo autophosphorylation both in vitro and within X. citri cells. Structural analysis of the PknS kinase domain revealed the conservation of the canonical fold characteristic of Hanks-type kinases. PknS directly phosphorylates EcfK at five Ser/Thr residues located in two distinct regions of the sigma factor: the conserved sigma 2 domain (residue T51) and a nonconserved linker connecting domains sigma 2 and sigma 4 (residues T104, T106, S108, and S110). The conserved residue T51, previously shown to be essential for sigma factor activity in an EcfK homolog, corresponds to a site that directly interacts with the RNA polymerase beta ' subunit. Site-directed mutagenesis analyses further revealed that the conserved residue T106 is also critical for EcfK function. Structural studies indicated that, in addition to T51, phosphorylation at T106 activates EcfK by promoting its interaction with a positively charged pocket within the RNA polymerase beta ' subunit. Collectively, our findings describe a previously unknown signal transduction pathway involving a Hanks-type kinase and a sigma factor, providing new insights into the mechanisms of sigma factor activation via phosphorylation in bacteria. (AU)

Processo FAPESP: 22/06555-3 - Mecanismos moleculares envolvidos na resistência de Xanthomonas citri a predação por Dictyostelium discoideum e o papel do sistema de secreção do tipo VI
Beneficiário:Cristina Elisa Alvarez Martinez
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 21/10577-0 - Centro de Pesquisa em Biologia de Bactérias e Bacteriófagos (CEPID B3)
Beneficiário:Shaker Chuck Farah
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Centros de Pesquisa, Inovação e Difusão - CEPIDs
Processo FAPESP: 24/22312-9 - ANÁLISE DE PERFIS TRANSCRICIONAIS DE Xanthomonas citri pv. citri EM CONDIÇÕES RELEVANTES PARA A INFECÇÃO DE PLANTAS
Beneficiário:Brenno Wendler Miranda
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo FAPESP: 21/12236-5 - Estudo de proteínas estruturais do material genético bacteriano
Beneficiário:Rogério Ferreira Lourenço
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Jovens Pesquisadores
Processo FAPESP: 22/11998-1 - ESTUDO DE POTENCIAL PROTEÍNA EFETORA ASSOCIADA AO SISTEMA DE SECREÇÃO DO TIPO VI DE Xanthomonas citri subsp. citri
Beneficiário:José Felipe Teixeira da Silva Santos
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo FAPESP: 23/05679-3 - Caracterização do gene xac4136 como possível efetor anti-eucariótico do Sistema de Secreção do tipo VI em Xanthomonas citri
Beneficiário:Enzo Breviglieri Sichi de Mello
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo FAPESP: 22/15160-2 - Caracterização in vivo da dinâmica de interação entre Xanthomonas citri e Dictyostelium discoideum e a função de efetores candidatos anti-eucarióticos
Beneficiário:Natalia Carolina Drebes Dorr
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 24/22005-9 - Desenvolvimento de Ferramentas de Biologia Química para Avançar o Estudo e a Descoberta de Fármacos para as Quinases Serina/Treonina de Mycobacterium tuberculosis
Beneficiário:Daiane Laise da Silva
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 14/50897-0 - INCT 2014: Centro de Química Medicinal de Acesso Aberto
Beneficiário:Katlin Brauer Massirer
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático