Produção de progesterona in vitro pelas células do corpo lúteo bovino ao longo da gestação

Autor(es)

Mariana N. La Paz ^[1] ; Vanessa U. Fonseca ^[2] ; Danila B. Campos ^[3] ; Laura P. Artoni ^[4] ; Liza M. M. C. Sousa ^[5] ; Paula C. Papa ^[6]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia - Brasil

^[2] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia - Brasil

^[3] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia - Brasil

^[4] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia - Brasil

^[5] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia - Brasil

^[6] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia - Brasil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Pesquisa Veterinária Brasileira; v. 27, n. 9, p. 370-376, 2007-09-00.

Resumo

O presente trabalho foi desenvolvido para testar a hipótese de que células luteínicas bovinas em cultivo, provenientes dos três terços de gestação, comportam-se da mesma maneira que células in vivo em relação à produção de P4. Foram coletadas amostras de corpos lúteos (CL) de 90 (n=3), 150 (n=3) e 210 (n=3) dias de gestação obtidos em abatedouro. Sob condições assépticas, as células foram mecanicamente dispersas e cultivadas em placas de 96 poços. Após 24 horas de cultivo foram feitas a lavagem dos poços e a adição do precursor pregnenolona. Os tratamentos foram realizados em octuplicata para cada tempo de tratamento (24, 48 e 96 horas) com três repetições de cada período gestacional. As amostras de meio de cultura e as células foram coletadas 24, 48 e 96 horas após adição do precursor e acondicionadas em freezer a -20ºC até o processamento. A progesterona foi dosada através de radioimunoensaio e o conteúdo protéico pelo método de Lowry. Os resultados foram analisados estatisticamente e considerados diferentes quando p<0.05. Foi observada maior produção de P4 aos 90 dias de gestação (35,277±0,075), posterior decréscimo aos 150 dias (28,820±0,231) e novo aumento aos 210 dias (32,777±0,099). A produção de P4 em células cultivadas por 24 horas foi maior (p<0,05) em células oriundas do grupo de 90 dias (2,912±0,047) quando comparado a 150 (2,669±0,137) e 210 dias (2,741±0,088). As 48 e 96 horas de cultivo, células luteínicas bovinas de 90 dias produziram mais P4 que células de 210 dias (2,934±0,029 e 2,976±0,121 respectivamente x 2,760±0,059 e 2,695±0,149, respectivamente; p<0,05), que por sua vez produziram mais do que células de 150 dias (2,334±0,084 para 48 horas e 2,205±0,136 para 96 horas). Aos 150 dias de gestação a produção de progesterona apresentou diminuição gradativa ao longo das 96 horas de cultivo. Essas diferenças podem ser explicadas pela expressão gênica diferencial de enzimas ou também de fatores presentes na cascata esteroidogênica de acordo com a idade gestacional. Este modelo de cultura celular luteínica poderá ser utilizado em estudos funcionais uma vez que o padrão de secreção de P4 mimetizou o que ocorre in vivo. (AU)

• Processo FAPESP: 05/51899-7 - Efeitos do vegf e bfgf sobre a producao de estrogenos na placenta de bovinos clonados e nao clonados.
• Beneficiário: Liza Margareth Medeiros de Carvalho Sousa
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Processo FAPESP: 05/50243-0 - Quantificação da produção de progesterona pelo corpo lúteo gestacional bovino sob estimulo do VEGF e bFGF
• Beneficiário: Mariana Nunes La Paz
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Processo FAPESP: 02/07392-7 - Expressão do VEGF e bFGF na placenta bovina e seus efeitos sobre a produção de hormônios esteróides neste órgão
• Beneficiário: Paula de Carvalho Papa Keohane
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores