Ensaio in vitro da enzima nitrato redutase e efeito da disponibilidade de nitrato e fosfato em variantes pigmentares de Hypnea musciformis (Wulfen) J. V. Lamour. (Gigartinales, Rhodophyta)

Autor(es)

Aline P. Martins ^[1] ; Fungyi Chow ^[2] ; Nair S. Yokoya ^[3]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Instituto de Botânica. Seção de Ficologia - Brasil

^[2] Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências - Brasil

^[3] Instituto de Botânica. Seção de Ficologia - Brasil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Rev. bras. Bot.; v. 32, n. 4, p. 635-645, 2009-12-00.

Resumo

A enzima nitrato redutase (NR) catalisa a redução do nitrato a nitrito e controla a taxa de assimilação do nitrato. O ensaio in vitro da nitrato redutase foi otimizado para a linhagem selvagem (marrom, MA) e para a linhagem deficiente em ficoeritrina (verde-clara, VC) de Hypnea musciformis. As duas linhagens foram cultivadas em temperatura de 23 ± 2°C, fotoperíodo de 14 horas, irradiância de 60-90µmol fótons m-2s-1, e meio composto por água do mar esterilizada (30ups) enriquecida com a solução de von Stosch na concentração de 50% (VSES/2). As condições ótimas de ensaio para ambas as linhagens foram: 40µM de NADH; 10min de incubação do extrato bruto (EB) e 100µL de EB. A atividade ótima da NR ocorreu em 4 e 2mM de nitrato para a linhagem VC e MA, respectivamente. As linhagens VC e MA apresentaram, respectivamente, constante aparente de Michaelis-Menten (K M) para NADH de 0,2068 e 0,0837 µM, e K M para nitrato de 0,0492 e 0,0294mM. Os resultados indicam que a NR da linhagem MA tem maior afinidade pelo substrato do que a NR da linhagem VC de H. musciformis. Os experimentos para avaliar os efeitos da disponibilidade de nitrato (5 a 105µM) e nitrato e fosfato (0,5 a 25,5µM, com a relação N:P de 4:1) mostraram que a atividade da NR das linhagens VC e MA não aumentou com a adição de nitrato no meio, o que pode estar relacionado com o estado nutricional dessas algas. A atividade da NR foi maior nos tratamentos com adição de fosfato do que naqueles com adição de apenas nitrato, indicando que esse nutriente é importante para os processos metabólicos relacionados a atividade da NR. (AU)

• Processo FAPESP: 04/11459-5 - Efeitos da disponibilidade do nitrato no metabolismo do nitrogênio em variantes pigmentares de Hypnea musciformis (Gigartinales, Rhodophyta)
• Beneficiário: Aline Paternostro Martins
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado