Uso de agentes modificadores de cromatina na transferência nuclear de células somáticas em bovinos

Resumo

A clonagem em bovinos tem ganhado importância crescente na pecuária nacional com o aumento da demanda pela clonagem de animais geneticamente superiores e com o surgimento de empresas que disponibilizam esta tecnologia aos pecuaristas. Além das aplicações comerciais a técnica de transferência nuclear (TN) também serve como modelo para estudo do desenvolvimento embrionário e da reprogramação nuclear. No entanto, a técnica ainda possui limitações, em especial, uma baixa eficiência em gerar animais a termo. A principal razão para esta eficiência insatisfatória reside na inadequada reprogramação nuclear (remodelação da cromatina) da célula doadora de núcleo após a transferência nuclear. Em outras palavras, os padrões epigenéticos (metilação de DNA e modificações pós-transcricionais nas proteínas histonas) resultantes da remodelação da cromatina pelo oócito receptor são na maioria das vezes incompatíveis com o desenvolvimento. O emprego de moléculas capazes de modificar a cromatina e auxiliar a reprogramação nuclear produzida pelo citoplasma do oócito consiste em uma estratégia capaz de mudar o panorama da clonagem. A presente proposta tem como objetivos avaliar o uso de inibidores das DNA metiltransferases (agentes desmetilantes) e inibidores das histonas desacetilases (agentes acetilantes) em linhagens celulares destinadas à TN, avaliando as diferenças epigenéticas resultantes nas células e visando aumentar a eficiência da clonagem em bovinos modificando a cromatina da célula doadora de núcleo antes da transferência para o oócito receptor. Em anexo, são apresentados resultados preliminares que indicam efeito positivo do uso de agentes modificadores da cromatina nas taxas de desenvolvimento de embriões clonados.