Influência da idade gestacional no perfil epigenético placentário

Resumo

O imprinting genômico, processo regulado epigeneticamente segundo o qual os genes se expressam de acordo com sua origem parental (paterna ou materna), está envolvido no desenvolvimento placentário. Na região cromossômica 11p15.5 encontram-se vários genes importantes para o desenvolvimento fetal e da placenta, os quais são regulados por duas principais regiões controladoras de imprinting (ICR1 e 2) onde se encontram as regiões diferencialmente metiladas KvDMR1 e H19DMR. O presente trabalho tem como objetivos verificar a influência da idade gestacional no perfil epigenético placentário, bem como a existência de mosaicismo em relação ao padrão de metilação dentro de uma mesma placenta. Serão selecionadas 35 placentas sendo 15 do terceiro trimestre de gestação, 15 do segundo e cinco do primeiro. Adicionalmente, serão avaliadas quatro regiões distintas de quatro placentas de gestações a termo. Após extração do DNA de tecido placentário, serão utilizadas técnicas de Biologia Molecular [Reação em Cadeia da Polimerase Específica para a Metilação (MS-PCR), Análise Combinada de Bissulfito e Restrição Enzimática (COBRA) e Método de Digestão Enzimática Sensível à Metilação Associada à PCR em Tempo Real] para o estudo do padrão de metilação da KvDMR1 e da H19DMR. Os resultados obtidos poderão fornecer informações sobre se a metilação do DNA apresenta variações durante a gestação, principalmente em relação a estágios precoces dos quais há poucos dados na literatura. Por outro lado, a pesquisa de mosaicismo na placenta auxiliará na forma de coleta futura de amostras e na verificação da ocorrência de erros em análises de um único fragmento.