Análise microbiológica, de endoxinas e de citocinas pró-inflamatórias em infecções endodônticas primárias com presença de lesões periapicais

Resumo

O principal fator de virulência das bactérias Gram-negativas é representado pela liberação de endotoxinas (LPS) presentes na membrana externa da parede celular bacteriana. O acumulo destes componentes bacterianos no canal radicular e na região periapical pode estimular macrófagos presentes na área a produzirem citocinas, tais como a IL-1 e TNF-± que são potentes estimuladores da reabsorção óssea. Assim, o objetivo do presente estudo é isolar e identificar microrganismos anaeróbios Gram-negativos através de métodos bioquímicos e de PCR, de canais radiculares de dentes com necrose pulpar e lesão periapical, avaliando o efeito do preparo químico-mecânico (PQM) com gel de clorexidina 2% y EDTA 17%, usando ou não ultrasom, na redução dos microrganismos e LPS, correlacionando a microbiota e conteúdo endotóxico com a expressão das citocinas pró-inflamatórias IL-1±, IL-1b, TNF-a e PGE-2. Serão selecionados 24 pacientes com dentes com necessidade de intervenção endodôntica por necrose do tecido pulpar, com presença de lesão periapical. Amostras de endotoxinas e microbiológicas serão coletadas antes do PQM, depois do PQM, depois do uso de EDTA 17%, com uso o não de ultrasom, e finalmente depois de 7 dias da primeira sessão. Amostras para quantificação de citocinas também serão coletadas, passando um cone de papel 1 mm alem do ápice radicular depois do PQM e aos 7 dias. As amostras microbiológicas serão diluídas, plaqueadas e incubadas para posterior isolamento e identificação. Reação de PCR será realizada utilizando primers específicos e as amostras de LPS serão armazenadas para posterior analise pelo método Limulus Amoebocyte Lysate (LAL). As citocinas coletadas do periapice serão quantificadas utilizando kits específicos para dosagem de cada uma. Os valores obtidos serão tabulados e estatisticamente analisados.