Dietas ricas em ácidos graxos saturados, trans e poliinsaturados na função secretora do tecido adiposo e na ativação da via de TLR4 e NF-kB: estudo in vivo e in vitro em adipócitos 3T3-L1 e miócitos C2C12

Resumo

Este projeto objetiva avaliar se a ingestão de dietas ricas em ácidos graxos saturados e trans desencadeiam efeito pró-inflamatório, promovendo resistência à insulina e outros efeitos deletérios por causarem endotoxitose e ativação da via de sinalização do TLR-4 e do NF-ºB no músculo e tecido adiposo, e concomitante aumento na secreção de adipocinas pró-inflamatórias envolvidas nestas doenças. Para isso realizaremos estudos in vivo utilizando camundongos, com um mês de idade, divididos em 4 grupos de acordo com o tipo de lipídio ingerido: (C) normolipídica, (P) hiperlipidica poliinsaturada, (PT) hiperlipidica poliinsaturada+trans, (S) hiperlipídica saturada; e estudos in vitro em adipócitos 3T3-L1 e miócitos do tipo C2C12, tratados com ácido palmítico, oléico e linoléico cis e trans. Após o tratamento por 8 semanas verificaremos: massa corporal e consumo alimentar; a tolerância oral à glicose, conteúdo de gordura e proteína da carcaça e concentrações séricas de TNF-±, IL-6, insulina, adiponectina, endotoxina, triglicerídeos, colesterol, HDL colesterol e glicose. Nos tecidos adiposos brancos retroperitonial (RET), epididimal (EPI) e mesentérico (MÊS) determinaremos: as expressões gênicas de adipocinas, TNF-±, IL-6 e adiponectina, a expressão gênica e protéica do TLR4, a expressão protéica do MyD88 e TRAF6, e das formas fosforilada e não fosforilada das proteínas envolvidas no desacoplamento do NF-ºB do IºB e a interação NF-ºB-DNA. No músculo gastrocnêmio (GAST) avaliaremos a concentração de TNF-± e IL-6, a expressão gênica e protéica do TLR4; a expressão protéica do MyD88 e TRAF6, e das formas fosforilada e não fosforilada das proteínas envolvidas no desacoplamento do NF-ºB do IºB e a interação NF-ºB-DNA. No décimo dia (adipócitos) e sétimo dia (miócitos) após a diferenciação, as seguintes análises serão realizadas:Nos adipócitos 3T3-L1 avaliaremos: a expressão gênica de TNF-±, IL-6 e adiponectina, a produção de TNF-±, IL-6 e adiponectina, a expressão gênica e protéica de TLR4 e a expressão protéica do MyD88 e TRAF6, e das formas fosforilada e não fosforilada das proteínas envolvidas no desacoplamento do NF-ºB do IºB e a interação NF-ºB-DNA.Nos miócitos C2C12 determinaremos: a expressão gênica e protéica do TLR4 e a expressão protéica do MyD88 e TRAF6, e das formas fosforilada e não fosforilada das proteínas envolvidas no desacoplamento do NF-ºB do IºB e a interação NF-ºB-DNA. (AU)