Avaliação do perfil de expressão de microRNAs em reticulócitos e em cultura de células CD34+ de indivíduos com PHHF-2 e de pacientes com Delta-beta-talassemia Siciliana

Resumo

Alterações nas hemoglobinas conhecidas como Hemoglobinopatias, constituem um grupo heterogêneo de doenças genéticas causadas por mutações que afetam genes responsáveis pela síntese das cadeias. A Persistência Hereditária de Hemoglobina Fetal (PHHF) consiste num desses grupos sem manifestações clínicas significativas resultando em altos níveis de HbF durante a vida adulta. Tais alterações moleculares ocorrem no grupo de genes da globina beta, sendo divididas em duas categorias: as formas delecionais e as não delecionais de PHHF. Duas deleções relacionadas a PHHF (PHHF-1 e PHHF-2) já foram descritas na população brasileira segundo os estudos realizados nos programas de triagem do Hemocentro e do Hospital das Clínicas da Unicamp. As delta-beta- talassemias também se originam a partir de deleções, em muitos casos bastante similares às que originam as formas delecionais de PHHF. Algumas hipóteses podem ser propostas para explicar a relação das deleções relacionadas a PHHF com a ausência de supressão normal dos genes gama na fase adulta e uma delas está relacionada ao controle pós-transcricional e a atuação dos microRNAs. Tais moléculas podem ser as responsáveis por esse mecanismo de regulação afetando a expressão diferencial das globinas e de alguns fatores de transcrição que as regulam. Nesse projeto, investigaremos esse possível mecanismo de regulação gênica tanto em reticulócitos quanto em cultura de diferenciação eritróide a partir de células CD34+, avaliando o perfil de expressão diferencial dos microRNAs. Posteriormente, avaliaremos o efeito do bloqueio e/ou indução de alguns desses pequenos RNAs sobre a expressão das globinas (alfa, beta e gama) e de alguns fatores de transcrição como ARID1B, TSPYL1 e ZHX2 que são potenciais candidatos a reguladores das globinas. Esta investigação pode ajudar a compreender as diferenças fenotípicas encontradas entre PHHF delecional e Delta-beta-talassemia.