Caracterização estrutural de complexos membranários envolvidos na síntese da parede celular bacteriana

Resumo

A parede celular desempenha função essencial na manutenção da sobrevivência bacteriana, prevenindo a lise osmótica e conferindo rigidez e formato à célula. As enzimas envolvidas na biossíntese de seu componente central, o peptideoglicano, há muitos anos são utilizadas como alvos de antibióticos. Porém, o número crescente de cepas resistentes traz a necessidade do estudo e da caracterização de novos alvos moleculares. Neste sentido, o objetivo desse trabalho é caracterizar estruturalmente os complexos formados entre flippases e PBPs, proteínas essenciais para a síntese do peptideoglicano, assim como as flippases complexadas a inibidores. A resolução das estruturas atômicas dessas proteínas auxiliará no desenvolvimento de fármacos e também permitirá um melhor entendimento bioquímico da síntese da parede celular. As metodologias utilizadas para alcançar esses objetivos incluem a expressão e a purificação das proteínas, além de experimentos de cristalografia efetuados no síncrotron do LNLS em Campinas. Adicionalmente, será utilizada a biblioteca de compostos do LNBio na busca de novos inibidores para as flippases. O projeto temático intitulado "Estruturação de complexos macromoleculares da parede celular bacteriana", dirigido pela Andréa Dessen, compreende um laboratório no Laboratório Nacional de Biociências (LNBio), em Campinas-SP, com quatro pesquisadores, e um laboratório no Institut de Biologie Structurale (IBS), em Grenoble, na França, com 10 pesquisadores. O grupo conta ainda com a colaboração do laboratório do Dr. Eefjan Breukink, em Utrecht, na Holanda. O candidato realizará a maior parte do trabalho de doutoramento no LNBio, porém, devido à larga experiência dos pesquisadores de Grenoble na cristalização de proteínas de membrana, consideramos que o aluno adquirirá bastante experiência realizando algumas etapas do projeto em Grenoble. Os resultados obtidos com este estudo, permitirão uma melhor compreensão da síntese do peptideoglicano e de como ela se inter-relaciona com outras etapas do ciclo de vida bacteriano. Além disso, o conhecimento da estrutura das proteínas permitirá que novos alvos moleculares sejam utilizados como antimicrobianos. (AU)