Efeitos da deficiência e suplementação de zinco sobre a hepatocarcinogênese química em camundongos

Resumo

O Carcinoma Hepatocelular (CHC) representa aproximadamente 6% de todos os casos incidentes de câncer e é a terceira maior causa de morte por câncer globalmente. O desenvolvimento desta neoplasia envolve grande complexidade em sua patogênese e destaca-se o envolvimento de metais, incluindo o ferro, zinco e cobre. O zinco é um metal que, devido à diversidade de funções que desempenha no organismo, tem sido alvo de estudos que o definem como um agente promissor para a prevenção do câncer. Assim, o projeto tem como objetivo avaliar os efeitos de diferentes concentrações de zinco na dieta sobre o desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas e neoplásicas no modelo de hepatocarcinogênese induzido pela Dietilnitrosamina (DEN) e promovido pelo Fenobarbital sódico (FB) em camundongos Balb/C neonatos. Para tanto, camundongos machos Balb/C serão iniciados com dose única de Dietilnitrosamina (DEN, 50 mg/kg p.c., i.p.) no 15º dia pós-natal (DPN 15). No DPN 28 (desmame), os animais serão randomicamente divididos em três grupos recebendo ração preparada com concentrações variáveis de zinco na dieta padrão, com níveis adequados (35 mg/kg de ração), deficiência (3 mg/Kg de ração) ou suplementação (180 mg/Kg de ração) e 0,05% de fenobarbital sódico (50 g/Kg de ração) até a eutanásia. Os animais serão sacrificados em dois momentos do experimento, parte será sacrificada ao final de 12 semanas após o desmame (n=10/grupo) e o restante quando o experimento completar 24 semanas após o desmame (n=10/grupo). Os animais serão sacrificados em dois momentos visando avaliar os efeitos da exposição ao zinco sobre as lesões pré-neoplásicas e sobre o desenvolvimento de neoplasias. Na ocasião da eutanásia, será coletado o fígado dos animais, além de amostras de sangue total e soro. As amostras de fígado serão destinadas ao processamento histológico (reação de imunoistoquímica e H&E) e será calculada a incidência, multiplicidade, índices de proliferação celular (Ki-67) e apoptose, e expressão do fator de crescimento e transformação alfa (TGF-a) e das proteínas p53 e ²-catenina em lesões pré-neoplásicas e neoplásicas no fígado dos roedores. Para as análises moleculares (Western Blot e zimografias) e bioquímicas, serão determinadas à expressão e atividade das metaloproteinases de matriz (MMP-2 e 9), atividade das enzimas catalase e SOD e níveis de zinco em amostras hepáticas. Também será realizado teste do cometa em amostras hepáticas. As amostras séricas serão destinadas para as determinações das enzimas ALT, AST, FA e ³-GT e dos níveis de zinco no sangue total. (AU)