Avaliação de suscetibilidade e estudo de gene de resistência de isolados de Candida albicans obtidos de espécimes clínicos no Hospital de Clínicas da UNICAMP

Resumo

Leveduras do gênero Candida são integrantes da microbiota normal do corpo humano. Quando há um desequilíbrio na relação entre microbiota e hospedeiro, essas podem se tornar patógenos oportunistas, sendo C. albicans a espécie mais frequente. A candidíase sistêmica ou visceral apresenta sintomatologia infecciosa localizada e pode disseminar-se a outros órgãos por via hematogênica. O antifúngico Fluconazol inibe a síntese de ergosterol - componente essencial da membrana da célula fúngica - e é amplamente utilizado para profilaxia e tratamento de infecções causadas por espécies de Candida. Enquanto algumas espécies são geneticamente resistentes (C. krusei) ou facilmente adquirem resistência (C. glabrata) a Fluconazol, não há muitos relatos de resistência em C. albicans. Porém, esta é capaz de desenvolver mecanismos de resistência a Fluconazol, incluindo mutações no gene ERG11, que codifica a produção da enzima que atua na biossíntese do ergosterol. O presente estudo objetiva a caracterização do perfil de suscetibilidade frente a antifúngicos de isolados de C. albicans obtidos de hemoculturas e a investigação da ocorrência de mutações no gene ERG11 de dois isolados de C. albicans que apresentam resistência fenotípica in vitro a Fluconazol. O teste de suscetibilidade in vitro aos antifúngicos por microdiluição em caldo será realizado segundo os documentos M27A3 e S4 (CLSI). A triagem de mutações no gene ERG11 ocorrerá pela amplificação de três regiões gênicas, com os iniciadores ERGSec1A/1B, ERGSec2A/2B e ERGSec3A/3B. O produto resultante será submetido a sequenciamento e análise dos fragmentos de DNA amplificados por meio da comparação a uma cepa padrão sensível a Fluconazol (C. albicans ATCC 90028). (AU)