Avaliação da redução e resistência bacteriana via múltiplos ciclos de terapia fotodinâmica

Resumo

Neste estudo, comparando amostras clínicas e ATCC avaliaremos a redução e a resistência das bactérias periodontopatogênicas, após aplicações sucessivas De Terapia Fotodinâmica (TFD) mediadas por Curcumina, Clorina e6 e azul de metileno. Estas condições serão testadas tanto suspensão quanto em biofilme múltipla espécie. Os testes iniciais serão desenvolvidos a partir de uma mistura de cepas ATCC que estão envolvidas na instalação da doença; Enterococcus faecalis (ATCC 29212), Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum (ATCC 25586) e Propionibacterium acnes (ATCC 6919), com o intuito de mimetizar a condição clínica e numa segunda etapa avaliaremos amostras clínicas subgengivais de placa bacteriana (biofilme dental) de pacientes em tratamento da doença periodontal da Faculdade de Odontologia de Araraquara-UNESP. Tanto em amostras clinicas quanto na mistura de cepas ATCC as suspensões bacterianas serão cultivadas em anaerobiose para a formação do biofilme in vitro. Após este período, faremos a identificação e quantificação das espécies bacterianas presentes nas amostras clínicas, por análise molecular e administraremos os fármacos (fotossensibilizadores) de acordo com os grupos avaliados. A exposição à luz será de acordo com o espectro de absorção de cada fotossensibiizador testado. O número de ciclos ideal para a redução bacteriana em suspensão e biofilme será determinado, bem como objetivamos avaliar a possibilidade do potencial dos microrganismos em desenvolver tal resistência após sucessivas aplicações da terapia fotodinâmica. A viabilidade celular será determinada por contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), ensaio de XTT, Concentração Inibitória Mínima (CIM), análise por imagem via microscopia eletrônica de varredura e quantificação da biomassa total. Estudos do potencial dos microrganismos em desenvolver resistência à TFD são de extrema importância, pois até o momento os resultados ainda são escassos e controversos. (AU)