Efeito neuroprotetor e imunomodulatório do dimetil-fumarato (DMF) após avulsão e reimplante de raízes motoras medulares associados à terapia celular

Resumo

Lesões no Sistema Nervoso Central (SNC) são motivo de intensas pesquisas no que se refere ao desenvolvimento de estratégias que restaurem a morfologia e funcionalidade das vias neurais afetadas. Diferentes modelos experimentais de lesão substanciaram a muitos dos conhecimentos atuais sobre regeneração e plasticidade neuronal e têm sido fundamentais para a investigação do potencial de diferentes métodos e tratamentos. Neste contexto, a avulsão de raízes ventrais medulares tem se mostrado um modelo reprodutível, uma vez que resulta na degeneração de 80% dos motoneurônios axotomizados, entre a segunda e a terceira semana após a avulsão. No entanto, os motoneurônios que sobrevivem à avulsão têm potencial regenerativo após o reimplante de raízes nervosas, podendo servir como um modelo de regeneração do SNC/SNP. No presente estudo, avaliaremos o potencial imunomodulador e neuroprotetor do dimetil-fumarato (DMF), tendo em vista seus efeitos positivos demonstrados no tratamento da esclerose múltipla. O DMF será associado com o reimplante de raízes medulares e com terapia celular empregando-se células-tronco mesenquimais adultas (derivadas de medula óssea e adipócitos). Dessa forma, animais submetidos à avulsão das raízes motoras medulares L4 a L6 serão submetidos ao reimplante agudo, pela utilização de selante heterólogo de fibrina, produzido pelo Centro de Estudos de Venenos de Animais Peçonhentos (CEVAP - UNESP) juntamente com as células-tronco. Em sequência, serão tratados com DMF (0, 7,5, 15, 30 e 45 mg/Kg; gavagem). Os resultados, após 1, 4 ou 12 semanas de tratamento, envolverão análise da sobrevivência neuronal, preservação sináptica medular e regeneração axonal no nervo isquiático, empregando-se para isso técnicas morfológicas (coloração de Nissl, microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão), moleculares (reatividade para Anexin V-Cy5, imunoistoquímica e PCR em tempo real) e funcionais ("walking track test" e von-Frey Eletrônico). (AU)